巨噬细胞移动抑制因子对结肠癌细胞增殖和血管形成的影响

论文摘要

目的:近年来有研究表明MIF在许多肿瘤中都有较高的表达,并有可能参与肿瘤的血管生成、增殖和迁移。但其具体机制目前还未完全阐明。本实验旨在观察抗人MIF抗体（Anti-MIF）对结肠癌细胞株HCT-116增殖的影响并通过检测VEGF在细胞的表达探讨其在肿瘤发生、发展中的作用。方法:MTT比色分析法检测Anti-MIF对HCT-116细胞的增殖影响,流式细胞仪检测经Anti-MIF处理后HCT-116细胞周期的变化。免疫组织化学方法及蛋白印迹（western-blot）法检测经Anti-MIF处理后细胞中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。结果: 100、200、400、800μg/L Anti-MIF在不同时间段处理HCT-116细胞后,24h组其细胞抑制率分别为（1.02%,3.90%,8.62%,15.28%）,48h组抑制率（2.16%,6.83%,18.24%,38.20%）,72h组抑制率（5.09%,12.92%,33.91%,53.56%）。细胞增殖明显受到抑制,呈时间-剂量依赖性特点。尤以72h组最为显著,分别跟0μg/L组比较均有统计学意义（P<0.05）,且组内两两比较均具有显著性差异（P<0.01）;100、200、400、800μg/L Anti-MIF处理HCT-116细胞72h后,流式细胞仪细胞周期分析表明G0/G1期细胞百分率上升,S期和G2/M期细胞百分率下降。以800μg/L组最为显著,G0/G1期、S期和G2/M期分别跟0μg/L组比较均有统计学意义（P<0.05）;Anti-MIF对细胞中VEGF的表达有明显抑制作用,其表达随着Anti-MIF剂量的增加而减少。Anti-MIF 100、200、400、800μg/L组作用72h后,VEGF蛋白表达分别为（20567.48±1522.19,7188.03±1011.59,13920.21±1305.72,13256.5±1266.09和11845.62±1071.20）,与0μg/L组比较,均具有统计学意义（P<0.05）。结论:Anti-MIF有效抑制细胞的增殖,且参与调节细胞的生长周期,能使细胞生长周期延长,阻碍其进入DNA合成期,从而使细胞的恶性增殖相应减慢。Anti-MIF能使细胞中VEGF的表达水平明显降低,MIF可能通过VEGF影响肿瘤血管形成,从而在结肠癌的发病中发挥重要作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 1 材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 参考文献
• 文献综述
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表文章情况