儿童肾病综合征糖皮质激素受体mRNA表达与糖皮质激素治疗的研究

论文摘要

目的：观察儿童原发性肾病综合征（primary nephrotic syndrome, PNS）治疗过程中糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor, GR）亚型GRa、GRβ的mRNA表达水平,探讨GRα和GRβ与儿童PNS的关系。通过GRα和GRβ的mRNA表达变化及各项临床指标的变化来评价三种糖皮质激素（glucocorticoid, GC）类药物对儿童PNS的疗效。方法：研究对象为天津市儿童医院2008年11月-2009年10月收治的55例初治PNS患儿,随机分为三组,泼尼松组（A组n=17）,曲安西龙组（B组n=20）,甲基泼尼松龙组（C组n=18）；以20名儿童为对照。PNS组分别在GC应用0周、4周、8周时取血,通过半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测外周血单个核细胞（PBMCs）中GRα和GRβ的mRNA表达水平,同时检测PNS组血浆胆固醇（Cho）、血浆白蛋白（Alb）、24小时尿蛋白定量（24hUP）的变化,监测患儿体重、血压、睡眠、饮食等各项临床指标,并记录激素治疗反应,随访转归情况。结果：1.GRα和GRβ的mRNA表达水平的变化1)PNS组和对照组相比GRα和GRβ的mRNA水平变化a)GC治疗0周时,PNS患儿GRα低于正常儿童,差异有统计学意义（P<0.05）；GRβ高于正常儿童,差异有统计学意义（P<0.05）。b)PNS患儿GRα表达在GC治疗4周比0周降低,治疗8周比4周升高,差异有统计学意义（P<0.05）；随着GC的治疗,PNS患儿GRβ表达在治疗4周比0周升高,治疗8周比4周升高,差异有统计学意义（P<0.05）。2)各PNS组GRα和GRβ的mRNA水平的变化a) GC治疗0周时,A、B、C三组的GRα和GRβ的mRNA水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。b)GC治疗4周时,A组和B组的GRα比较差异无统计学意义（P＞0.05）,C组高于A组和B组,差异有统计学意义（P<0.05）；GC治疗8周,A组和B组的GRα比较差异无统计学意义（P>0.05）,C组高于A组和B组,差异有统计学意义（P<0.05）。c)GC治疗4周时,C组和B组的GRβ比较差异无统计学意义P>0.05)；C组和B组均低于A组,差异有统计学意义（P＜0.05）；GC治疗8周,C组和B组的GRβ比较差异无统计学意义（P>0.05）；C组和B组均低于A组,差异有统计学意义（P<0.05）。3)PNS患儿GC耐药6例,在GC治疗0、4、8周时,其GRα均低于GC敏感患儿,GRβ均高于GC敏感患儿,差异有统计学意义（P＜0.05）。2.各项生化指标的变化随着GC治疗,所有PNS患儿的血浆胆固醇均降低；血浆白蛋白上升；24小时尿蛋白定量降低,差异有统计学意义（P<0.05）。1)Cho：三组PNS组差异无统计学意义（P＞0.05）。2) Alb:GC治疗4周时,C组和B组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；C组和B组均高于A组,差异有统计学意义（P<0.05）；GC治疗8周,C组和B组差异无统计学意义（P>0.05）；C组和B组均高于A组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3) 24hUP:GC治疗4周时和治疗8周时,C组和B组比较差异无统计学意义（P>0.05）；C组和B组均低于A组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1.PNS患儿,PBMCs中GRα和GRβ的mRNA表达存在异常,其表达的紊乱可能是造成GC耐药的原因之一。2.GC对PNS患儿的治疗,可以调节PBMCs中GRα和GRβ的mRNA表达,不同的GC调节其变化的程度不同,可根据调节水平来评价GC的疗效。3. RT-PCR方法可应用于临床检测PBMCs中GRα和GRβ的mRNA表达,指导PNS患儿的GC选择,评价治疗效果,预测治疗反应及转归。4.口服甲基泼尼松龙片可应用于初治PNS患儿的治疗；甲基泼尼松龙,曲安西龙对PNS患儿的治疗疗效优于泼尼松。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 对象和方法
• 1 研究对象
• 1.1 PNS组
• 1.2 对照组
• 2 主要仪器和试剂
• 2.1 主要试剂和药品
• 2.2 主要仪器设备
• 3 试验方法
• 3.1 标本采集
• 3.2 实验步骤
• 4 其他检测项目
• 5 随访
• 6 统计学处理
• 实验结果
• 1 患儿随访情况
• 2 GR α和GR β的PCR电泳结果
• 2.1 PNS组和对照组的GR α和GR β表达
• 2.2 PNS组在各个治疗时期GR α和GR β的表达
• 3 统计学分析
• 3.1 年龄的统计分析
• 3.2 GR α和GR β的统计分析
• 3.3 各项生化指标及临床表现的统计分析
• 3.4 相关性分析
• 讨论
• 1 关于原发性肾病综合征（PNS）治疗反应
• 2 关于糖皮质激素受体亚型和PNS的治疗
• 3 糖皮质激素药物的分类和在PNS的应用
• 4 关于GR α和GR β的测定方法
• 5 对本研究结果的分析讨论
• 5.1 本研究PNS组和正常对照组的选择及分组
• 5.2 PNS患儿GR水平与正常儿童的比较
• 5.3 PNS组经过不同GC治疗之后,GR α和GR β的变化
• 5.4 PNS组临床指标的变化
• 5.5 耐药组与敏感组患儿之间的GR的比较
• 5.6 GR亚型的mRNA表达与各项生化、临床指标的相关性分析
• 结论
• 参考文献
• 在学期间发表的文章
• 附录
• 综述
• 糖皮质激素受体的研究进展
• 综述参考文献
• 致谢