论文摘要
背景与目的变应性鼻炎（allergic rhintis,AR）是环境抗原刺激导致的一组以辅助性T细胞-2型（T helper cells,Th2）细胞因子优势表达、嗜酸性粒细胞选择性浸润、黏膜高反应和IgE过度合成为特征的疾病。近年研究发现,半乳糖凝集素-9（Galectin-9）与变态反应性疾病的发生密切相关。另外,作为Galectin-9特异性受体T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3（T cell immunoglobulin and mucin domaincontaining molecules-3,Tim-3）具有负相调节TH1细胞反应和诱导外周耐受的作用。地塞米松是有效抑制其气道炎症和高反应性的作用,但其具体治疗机制不清楚。罗格列酮是高选择性过氧化物酶体增殖物激活受体（Peroxisome prolif -erationactivated receptor-γ,PPAR-γ）的外源性强力配体激动剂,其与PPAR-γ结合后激活PPAR-γ的活性,调控许多炎性反应因子。本研究应用地塞米松和罗格列酮治疗AR小鼠,观察其用药前后Galectin-9和Tim-3表达的变化,初步探讨地塞米松和PPAR-γ激动剂罗格列酮对Galectin-9和Tim-3表达的影响及其可能的分子机制。目的以卵清蛋白（ovalbumin,OVA）为致敏源建立AR小鼠模型。方法20只BALB/c级小鼠随机分为变应性鼻炎组（AR组）和正常对照组（N组）,各10只。变应性鼻炎组（AR）、地塞米松组（DEX）和罗格列酮组（ROS）:第1、14天腹腔注射OVA10μg加氢氧化铝（Al（OH）3）2 mg的生理盐水悬液0.1 ml。第21天每侧鼻腔给与1%OVA各50μl,持续7天。N组用生理盐水代替OVA。症状学观察后,对各组鼻粘膜组织切片分别行染色和甲苯胺兰染色以进行病理观察,同时采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测外周血中IL-4、IL-5及IFN-γ的蛋白水平。结果与N组相比,在OVA激发后AR组小鼠出现明显的喷嚏、搔抓鼻周围、大量清涕流出的表现,AR小鼠鼻黏膜组织内存在明显的炎症反应,有多少不等的嗜酸粒细胞、肥大细胞以及不同程度的毛细血管扩张充。AR组IL-4、IL-5显著高于其它各组,N组IL-4、IL-5显著低于其它各组;而N组IFN-γ显著高于其它各组,AR组IFN-γ低于其它各组。结论本研究的小鼠AR模型诱导是成功的。这为下一步的实验研究奠定了良好的基础。目的观察Galectin-9和Tim-3蛋白和mRNA在小鼠鼻黏膜局部的表达,以确定Galectin-9及其受体Tim-3与AR的发病机制是否相关。方法小鼠分为AR组和N组,各10只。应用免疫组化技术观察鼻粘膜组织的Galectin-9和Tim-3表达情况。应用逆转录—聚合链反应（RT-PCR）的方法检测鼻粘膜中Galectin-9和Tim-3蛋白及mRNA的表达量,同时采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测外周血中IL-4、IL-5及IFN-γ的蛋白表达。结果AR组鼻粘膜Galectin-9和Tim-3基因及蛋白表达显著高于N组,其二者差异具有统计学意义（P＜0.05）。Tim-3mRNA表达强度与IL-4、IL-5蛋白表达量成正相关（r=-0.528,-0.73,p＜0.05）,但与IFN-γ蛋白表达量成负相关（r=0.967,p＜0.05）。结论变应性鼻炎小鼠鼻粘膜局部Galectin-9和Tim-3在转录水平和蛋白水平都有明显升高,并且其改变与TH1/TH2细胞因子表达量有直接关系,它们与变应性鼻炎炎症过程密切相关。目的研究PPAR-γ激动剂罗格列酮对小鼠鼻黏膜Galectin-9和Tim-3表达的影响。方法动物模型建立后,DEX组于第21天开始每日OVA激发之前30min之前给予5 mg/kg腹腔注射,同时ROS组给予5mg/kg灌胃,连续给药7天。观察发作一般情况,做小鼠鼻黏膜HE染色,血清IL-4、IL-5、IFN-γ含量,鼻黏膜组织中Galectin-9和Tim-3蛋白及mRNA的表达。结果应用二者治疗后小鼠变应性鼻炎发作时症状减轻,鼻黏膜局部嗜酸粒细胞浸润减少、血清Th2类细胞因子升高、Th1类细胞因子降低、鼻黏膜Galectin-9和Tim-3的表达降低。结论应用罗格列酮能抑制变应性鼻炎黏膜炎症反应,降低鼻黏膜Galectin-9和Tim-3的表达。
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