聚乙二醇修饰人血清白蛋白及其纳米微球制备

论文摘要

白蛋白纳米球具有的网状空隙结构，是一种理想的药物载体和控释靶向制剂。用甲氧基聚乙二醇（mPEG）对白蛋白纳米球进行化学修饰以达到表面改性，可能达到躲避吞噬细胞的捕获和增加其负载药物的途径。本文用三光气（BTC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化mPEG，单甲氧基聚乙二醇活性酯修饰人血清白蛋白成为mPEG-HSA，并将其制备成纳米微球，然后负载重组人生长激素，并初步研究其药理作用。以目标产物活性和得率为目标，考察并优化制备SC-mPEG的时间、pH、摩尔比、温度和浓度等反应条件。以溶剂-化学交联法将mPEG-HSA制备成纳米球，对交联时间、缓冲液、交联剂量等制备条件进行了优化以得到最佳的形态，载药量。确定了制备白蛋白微球的最佳工艺条件，白蛋白微球粒度可控制在纳米范围内。并用并用傅立叶红外光谱分析仪、紫外-可见分光光度计、电泳仪、高效液相色谱仪、透射电子显微镜、激光粒度分布仪对产物予以分析表征。FTIR表征活化的mPEG含有NHS的特征峰值，说明其为SC-mPEG，进一步分析检测mPEG中羟基活化率可达75％；HPLC和SDS-PAGE分析表明mPEG-HSA偶联不同数目mPEG；测得其修饰度达45％。TEM和LPA分析制备的纳米球外观圆整，粒径主要分布在600nm-700nm范围内，用制备好的纳米微球负载重组人生长激素。初步显示出了其缓释特性，可用于药物的长效缓释剂型中，这为以后研制靶向制剂奠定了基础。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 概述
• 1.1 引言
• 1.1.1 蛋白质药物
• 1.1.2 蛋白质药物的长效缓释
• 1.1.3 化学修饰蛋白质药物
• 1.1.4 蛋白质化学修饰的意义
• 1.2 聚乙二醇修饰蛋白质药物
• 1.2.1 聚乙二醇简介
• 1.2.2 聚乙二醇的活化
• 1.2.3 PEG修饰蛋白质药物位点
• 1.2.4 PEG修饰蛋白药物分析
• 1.2.5 PEG修饰蛋白药物的研究现状
• 1.3 白蛋白药物
• 1.3.1 白蛋白的简介
• 1.3.2 血清白蛋白药物的长效缓释
• 1.4 白蛋白纳米球制剂
• 1.4.1 白蛋白纳米球
• 1.4.2 mPEG-HSA纳米球的制备
• 1.4.3 白蛋白纳米球表面改性
• 1.4.4 mPEG-HSA纳米球的分析
• 1.4.5 白蛋白纳米微球制剂的研究状况
• 1.5 本文研究依据，内容，目标和意义
• 第二章 聚乙二醇活性酯的制备
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 实验仪器
• 2.2.2 实验试剂
• 2.2.3 单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯（SC-mPEG）的制备
• 2.2.4 红外光谱仪分析 SC-mPEG
• 2.2.5 PEG活化度的测定
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 反应时间对活化度的影响
• 2.3.2 摩尔比对活化度的影响
• 2.4 结论
• 第三章 聚乙二醇活性酯化学修饰 HSA
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 实验仪器
• 3.2.2 实验试剂
• 3.2.3 mPEG-HSA的制备
• 3.2.4 mPEG-HSA的分析检测
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 反应时间对修饰率的影响
• 3.3.2 pH对修饰率的影响
• 3.3.3 摩尔比对修饰率的影响
• 3.3.4 HSA浓度对修饰率的影响
• 3.4 结论
• 第四章 mPEG-HSA纳米微球的制备
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 实验仪器
• 4.2.2 实验试剂
• 4.2.3 mPEG-HSA纳米微球的制备
• 4.2.4 mPEG-HSA纳米微球的分析表征
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 交联时间的选择
• 4.3.2 丙酮和戊二醛溶液对mPEG-HSA纳米球制备结果的影响
• 4.3.3 溶剂的选择
• 4.4 结论
• 第五章 结论和展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 参考文献
• 硕士学位期间发表文章目录