李泽民:靶向EGFR二聚化界面单链抗体的构建及表达论文

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本文主要研究内容

作者李泽民,赵林,邓栩文,祝贺,邱创楠,温碧燕,刘梦苗,李黄金(2019)在《靶向EGFR二聚化界面单链抗体的构建及表达》一文中研究指出:[目的]构建靶向EGFR二聚化界面的单链抗体。[方法]构建单链抗体的基因并进行密码子优化,克隆于表达载体p GAPZα-A和毕赤酵母X-33。镍柱纯化目的蛋白,并对EGFR高表达细胞A431和EGFR正常表达细胞NIH-3T3进行体外抑制分析和抗磷酸化分析。[结果]纯化获得了分子量大小约29. 0 k Da的EGFR dimer Sc Fv蛋白。在48h体外抑制实验中,534 nmol/L EGFR dimer Sc Fv对A431和NIH-3T3的抑制率分别为34. 92±1. 30%和5. 89±0.46%,抑制作用与母本抗体相似。Western Blotting分析表明,EGFR dimer Sc Fv能显著抑制A431细胞EGFR磷酸化,而对NIH-3T3细胞显著无抑制作用。[结论]初步验证了靶向EGFR二聚化界面的单链抗体作为新型抗体药物的可行性,为后续研究奠定了基础。

Abstract

[mu de ]gou jian ba xiang EGFRer ju hua jie mian de chan lian kang ti 。[fang fa ]gou jian chan lian kang ti de ji yin bing jin hang mi ma zi you hua ,ke long yu biao da zai ti p GAPZα-Ahe bi chi jiao mu X-33。nie zhu chun hua mu de dan bai ,bing dui EGFRgao biao da xi bao A431he EGFRzheng chang biao da xi bao NIH-3T3jin hang ti wai yi zhi fen xi he kang lin suan hua fen xi 。[jie guo ]chun hua huo de le fen zi liang da xiao yao 29. 0 k Dade EGFR dimer Sc Fvdan bai 。zai 48hti wai yi zhi shi yan zhong ,534 nmol/L EGFR dimer Sc Fvdui A431he NIH-3T3de yi zhi lv fen bie wei 34. 92±1. 30%he 5. 89±0.46%,yi zhi zuo yong yu mu ben kang ti xiang shi 。Western Blottingfen xi biao ming ,EGFR dimer Sc Fvneng xian zhe yi zhi A431xi bao EGFRlin suan hua ,er dui NIH-3T3xi bao xian zhe mo yi zhi zuo yong 。[jie lun ]chu bu yan zheng le ba xiang EGFRer ju hua jie mian de chan lian kang ti zuo wei xin xing kang ti yao wu de ke hang xing ,wei hou xu yan jiu dian ding le ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自生物技术的李泽民,赵林,邓栩文,祝贺,邱创楠,温碧燕,刘梦苗,李黄金,发表于刊物生物技术2019年02期论文,是一篇关于表皮生长因子受体论文,二聚化界面论文,单链抗体论文,肿瘤论文,生物技术2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自生物技术2019年02期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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