EGCG、ECG对哺乳动物生殖细胞的影响

论文摘要

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是茶多酚中含量最多的单体物质,它可有效地起到抗氧化和清除体内自由基的作用。本研究通过以环磷酰胺诱导小鼠精子畸形作为阳性对照组,以不同剂量的EGCG处理,研究EGCG本身是否会诱导和抑制小鼠精子畸形的作用。并在猪卵母细胞体外培养时添加不同浓度的EGCG,研究EGCG对提高猪胚胎发育的影响,为其它哺乳动物胚胎的体外培养体系提供参考。本文也通过在小鼠体外培养时添加茶多酚第二大抗氧化成分表儿茶素没食子酸（ECG）,研究对小鼠胚胎体外发育的影响。主要的研究结果如下：1.EGCG对环磷酰胺诱导的小鼠精子畸形的影响：本实验中CP组精子畸形率显著性地高于阴性对照组（P<0.05）,说明造模成功。CP+各剂量EGCG组的精子畸形率不仅显著低于CP组（P<0.05）,而且又显著低于生理盐水对照组（P<0.05）,说明EGCG能够抑制CP诱发的小鼠精子畸形,还可以使精子畸形率下降到正常状态之下。本实验中还表明EGCG对于小鼠精子畸形的作用存在时间上的差异,第5周的不同剂量的EGCG组精子畸形率低于第4周的检验结果,而且第5周检验的不同剂量的EGCG抗CP诱导的作用较好与第4周的检验结果。2.EGCG对猪卵母细胞体外成熟的影响：添加不同浓度的EGCG对猪胚胎进行成熟培养,EGCG并不能有效提高卵裂率,各实验组卵裂率差异不显著（P>0.05）,添加30μmol/L ECG卵裂率略高于其他组,呈现增加的趋势。EGCG可以促进囊胚的发育,各实验组囊胚率差异不显著（P>0.05）,添加10μmol/L EGCG高囊胚率略高于其他组。添加不同浓度的EGCG对的猪胚胎进成熟培养,各实验组细胞成熟率差异不显著（P>0.05）,添加10μmol/L EGCG率略高于其他组,呈现增加的趋势。通过以上数据可知,在猪的卵母细胞培养体系添加EGCG时,对猪的体外胚胎发育有促进作用,但差异不显著。3.ECG对小鼠卵母细胞体外胚胎发育的影响：添加不同浓度的ECG对小鼠胚胎进行成熟培养,ECG并不能有效提高卵裂率,各实验组卵裂率差异不显著（P>0.05）,添加30μmol/L ECG卵裂率略高于其他组。ECG能提高囊胚率,可以促进胚胎囊胚的发育,但并无统计学差异。ECG能够有效提高细胞数,其中添加10μmol/L ECG组细胞数显著高于对照组和30μmol/L组（P<0.05）,但与20μmol/L组无统计学差异。通过以上数据可知,在小鼠卵母细胞培养体系添加低浓度10μmol/L、20μmol/L ECG时,对小鼠体外胚胎发育有显著促进作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略词表
• 文献综述
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 主要仪器和设备
• 1.1.3 主要试剂
• 1.1.4 试验用培养液及试剂配制方法
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 试验一：EGCG对环碟酰胺诱导的小鼠精子畸形的影响
• 1.2.2 试验二： EGCG对猪卵母细胞体外成熟的影响
• 1.2.3 试验三：ECG对小鼠卵母细胞体外胚胎发育的影响
• 1.3 试验设计
• 1.3.1 试验一 ：EGCG对环碟酷胺诱导的/j、鼠精子崎形的影响
• 1.3.2 试验二： EGCG对猪卵母细胞体外成熟的影响
• 1.3.3 试验三：ECG对小鼠体外胚胎发育的影响
• 1.4 统计分析
• 2 结果与分析
• 2.1 EGCG对环磷酰胺诱导的小鼠精子畸形的影响
• 2.1.1 显微镜下观察到的正常精子和头尾异常精子的形态
• 2.1.2 给药后第4周小鼠精子畸形检验的结果
• 2.1.3 给药后第5周小鼠精子畸形检验的结果
• 2.1.4 两周的小鼠精子畸形检验的相互比较（如图.2）
• 2.2 EGCG对猪卵母细胞体外成熟的影响
• 2.3 ECG对小鼠体外胚胎发育的影响
• 3 讨论
• 3.1 EGCG对环磷酰胺诱导的小鼠精子畸形的影响
• 3.2 EGCG对猪卵母细胞体外成熟的影响
• 3.3 ECG对小鼠体外胚胎发育的影响
• 4 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介