小鼠趋化因子Fractalkine基因修饰肿瘤疫苗抗肝癌免疫研究

小鼠趋化因子Fractalkine基因修饰肿瘤疫苗抗肝癌免疫研究

论文题目: 小鼠趋化因子Fractalkine基因修饰肿瘤疫苗抗肝癌免疫研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 内科学

作者: 唐俐

导师: 任红

关键词: 肝细胞癌,抗肿瘤免疫,基因治疗

文献来源: 重庆医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,对化疗和放疗均不敏感,能手术根治仅占 15%,易早期转移和术后复发、转移。免疫基因治疗是近年来出现的最有希望的预防和治疗原发性肝癌的候选方案之一。Fractalkine (FK)是一种 CX3C 趋化因子,具有强烈的趋化 T 淋巴细胞、单核细胞及 NK 细胞功能,在机体的炎性反应和免疫应答过程中发挥重要作用。本实验用 FK 基因修饰肝癌细胞制备肿瘤疫苗,观察其诱导的抗肿瘤效应及其免疫应答机制,为进一步探索联合基因治疗肿瘤及其转移提供实验基础和依据。 方法: 1.FK 真核表达载体在小鼠肝癌细胞系 MM45T.Li 细胞中的表达:采用阳离子脂质体转染方法,转染小鼠肝癌细胞系 MM45T.Li 细胞,用 G418 加压并以有限稀释法筛选出高效表达 FK 的抗性细胞克隆。用RT-PCR 和免疫细胞化学法检测 FK 在 MM45T.Li 细胞中的转录表达;光学显微镜观察质粒转染后细胞形态的变化;用 3H-TdR 掺入法检测转染质粒后对细胞增殖的影响;用 Transwell 检测体外 FK 的趋化活性。 2.FK 基因修饰肿瘤疫苗的抗肿瘤作用的研究:在 BALB/c 小鼠右侧腋部皮下接种建立三组实验动物模型,①MM45T.Li(野生型细胞),MM45T.Li-mock(空载体转染细胞)和 MM45T.Li-FK(FK 基因转染细胞),观察 FK 基因修饰瘤苗的抗肿瘤作用;另先接种 FK 基因转染细胞 4 周后,在原接种部位对侧再次接种野生型亲本细胞,观察瘤苗的

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正文 小鼠趋化因子 Fractalkine 基因修饰肿瘤疫苗抗肝癌免疫研究

前言

第一章 小鼠 Fractalkine 基因真核表达质粒在真核细胞中的表达

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

第二章 Fractalkine 真核表达质粒诱导小鼠的抗肝癌作用及其免疫机制

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

本课题的创新点

参考文献

文献综述一

文献综述二

致谢

博士学位期间发表的学术论文

发布时间: 2005-07-22

参考文献

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