胀果甘草叶总黄酮提取工艺及治疗前列腺炎的物质基础研究

论文摘要

从民间的治疗实践中发现,胀果甘草叶水提物对于治疗前列腺疾病,尤其是慢性非细菌性前列腺炎有很好的疗效,但确切疗效的物质基础并不清楚。本文首先优化胀果甘草叶中总黄酮提取工艺及测定甘草酸、总糖的含量。其次,进行了甘草叶水提取物的成分分析及二甲苯所所致小鼠耳片肿胀和角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀急性炎症模型抗炎作用的研究。最后,在这两个抗炎实验中均显示了较好的抗炎作用前提下,研究了甘草叶水提物的不同剂量对慢性非细菌性前列腺炎的作用效果,为前列腺疾病的新药开发研制提供一些理论和实践基础。（1）利用正交实验法和响应面法分别对总黄酮的闪式提取工艺进行优化。结果表明:闪式提取法所用提取时间短、提取溶剂用量少。前者的最佳提取工艺为固液比1:40,乙醇浓度70%、提取时间6min;后者的最佳工艺条件为:乙醇浓度为70.2%、液固比为40.3:1、提取时间为5min,此工艺条件下总黄酮的提取率高达2.91%,与模型预测值基本相符。两种不同的分析方法的优化结果基本吻合,表明本文确定的最佳工艺条件准确,可靠。其次,用HPLC法测定了甘草根、茎、叶中的甘草酸含量。其中根中甘草酸的平均含量为2.94%,叶中的甘草酸含量很低,仅为0.033% ,茎中几乎检测不到。最后用苯酚-硫酸法测定甘草叶中总糖含量为15.93%,RSD=0.55%。（2）采用2.2的最佳提取工艺条件及测定方法测定了甘草叶水提物中的总黄酮含量为2.73%,采用同2.3、2.4的测定方法测定了甘草叶水提物中的甘草酸、总糖的含量,甘草酸检测不到,总糖为5.92%。采用二甲苯所所致小鼠耳片肿胀和角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀两种模型研究抗炎作用。结果表明,水提物和水提物分离得到的3个乙醇溶液洗脱组分在抗炎实验中的肿胀抑制率比正常组有明显提高,且50%乙醇溶液洗脱组分的抗炎效果最好。（3）采用前列腺背叶注入1%角叉菜胶生理盐水溶液的方法成功地制作了慢性非细菌性前列腺炎的动物模型,将甘草叶水提物分为大、中、小剂量组,研究了甘草叶水提物对慢性非细菌性前列腺炎的治疗作用。结果显示,甘草叶大、中剂量组效果好于阳性对照组,白细胞数量得到明显降低,卵磷脂小体密度明显升高。病理切片结果显示了其抗前列腺炎的良好效果。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 胀果甘草的研究现状
• 1.1.1 胀果甘草简介
• 1.1.2 胀果甘草化学成分研究概况
• 1.1.3 胀果甘草药用研究概况
• 1.1.4 甘草总黄酮的提取和测定方法
• 1.1.5 甘草酸的提取和测定方法
• 1.2 前列腺炎的治疗研究进展
• 1.2.1 前列腺炎概述
• 1.2.2 前列腺炎病因学
• 1.2.3 甘草用于治疗前列腺炎现状
• 1.3 研究目的、意义及主要内容
• 第二章 总黄酮提取工艺优化及甘草酸、总糖含量测定
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 原料
• 2.1.2 试剂与药品
• 2.1.3 仪器
• 2.2 甘草叶总黄酮提取工艺优化
• 2.2.1 正交实验优化甘草叶总黄酮提取工艺
• 2.2.2 响应面法优化甘草总黄酮提取工艺
• 2.3 甘草根、茎、叶中的的甘草酸HPLC 含量测定
• 2.3.1 实验方法
• 2.4 甘草叶总糖含量测定
• 2.4.1 5%苯酚试剂的配制
• 2.4.2 标准葡萄糖溶液的配制
• 2.4.3 样品的测定
• 2.5 结果与讨论
• 2.5.1 正交实验优化甘草总黄酮提取工艺
• 2.5.2 响应面法优化甘草总黄酮提工艺
• 2.5.3 甘草根、茎、叶中的的甘草酸HPLC 含量测定结果
• 2.5.4 甘草叶总糖含量测定
• 2.6 本章小结
• 第三章 胀果甘草叶水提物成分分析及抗炎作用研究
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 原料
• 3.1.2 试剂
• 3.1.3 仪器
• 3.2 动物实验样品的制备
• 3.3 对二甲苯所所致小鼠耳片肿胀的影响
• 3.3.1 实验原理
• 3.3.2 实验方法
• 3.4 对角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀的影响
• 3.4.1 实验原理
• 3.4.2 实验方法
• 3.5 对局部炎症组织PGE2 含量的影响
• 3.5.1 实验原理
• 3.5.2 实验方法
• 3.6 统计方法
• 3.7 胀果甘草叶水提物成分分析
• 3.8 实验结果与讨论
• 3.8.1 对二甲苯所所致小鼠耳片肿胀实验结果
• 3.8.2 对角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀实验结果
• 3.8.3 对局部炎症组织PGE2 含量的影响结果
• 3.8.4 胀果甘草叶水提物主要成分
• 3.8.5 讨论
• 3.9 本章小结
• 第四章 甘草叶水提物抗前列腺炎作用研究
• 4.1 前列腺炎动物模型制作方法简介
• 4.1.1 慢性非细菌性前列腺炎动物模型的制作方法分类
• 4.1.2 目前国内外研究简介
• 4.2 动物模型检测指标
• 4.2.1 前列腺液中白细胞数量
• 4.2.2 前列腺液中卵磷脂小体密度
• 4.2.3 解剖观察
• 4.2.4 病理组织学观察
• 4.3 甘草叶水提物抗前列腺炎动物实验
• 4.3.1 实验材料、试剂和仪器
• 4.3.2 实验方法
• 4.3.3 实验结果
• 4.3.4 讨论
• 4.4 本章小结
• 第五章 总结与展望
• 5.1 全文总结
• 5.2 展望
• 参考文献
• 致谢
• 附录:攻读学位期间所发表的论文目录