PRRSV的感染差异性和抗体依赖性增强作用研究

论文摘要

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus, PRRSV）引起的一种病毒性传染病,该病的主要特征是造成仔猪呼吸障碍和母猪流产。PRRSV是单股正链RNA病毒,易变异,可引起猪的持续性感染和免疫抑制,具有抗体依赖性增强作用,因此研究PRRSV的感染差异性及抗体依赖性增强作用（Antibody-dependent enhancement,ADE）等感染机制对PRRS的防治具有重要意义。本试验通过用PRRSV疫苗样株（Hn-3/06）和变异株（Hn-1/06）分别感染试验猪,采用已建立的Real-time PCR方法检测不同时间段感染猪体内PRRSV的复制拷贝数,用ELISA方法检测不同时间段感染猪体内特异性ELISA抗体水平和IFN-α的表达量,用中和试验检测不同时间段感染猪体内中和抗体水平,研究了PRRSV疫苗样株和变异株的感染差异性。试验结果显示,两个毒株在猪体内的增殖规律基本一致,其中感染变异株比感染疫苗样株的猪体内病毒含量高,说明变异株比疫苗样株的感染复制能力稍强;两毒株诱导机体产生ELISA抗体和中和抗体的时间较晚,水平较低,其中感染疫苗样株比感染变异株的猪体内ELISA抗体水平稍高,两毒株均不能诱导机体产生可检测的IFN-α,表明两毒株感染猪机体后均能引起免疫抑制,其中变异株的体液免疫抑制能力比疫苗株强。再次攻毒试验结果显示,PRRSV感染能阻断同源毒株的复制,缩短异源毒株的病毒血症持续时间至7d左右,说明PRRSV感染能刺激机体产生一定的免疫保护力,但同源免疫保护力高于异源免疫保护力。以上试验结果推测,在PRRSV抗感染过程中,体液免疫并不起重要作用。本试验通过检测同源型病毒抗体复合物、异源型病毒抗体复合物和与PRRSV非相关的免疫复合物对PRRSV的增殖状况的影响,研究了体外PRRSV的抗体依赖性增强作用;通过用灭活苗免疫隐性带毒猪,研究了体内PRRSV的抗体依赖性增强作用。试验结果说明PRRSV在体外和体内均存在抗体依赖性增强作用,这为进一步揭示PRRSV的ADE效应机制提供了理论依据。本试验通过研究感染性和非感染性免疫复合物对PRRSV感染封闭后的猪肺泡巨噬细胞（PAM细胞）的影响,发现用鼠抗FcγRIIB阳性血清封闭PAM细胞后PRRSV感染PAM细胞的能力均增强。表明选择性封闭PAM细胞的FcγRIIB增强PRRSV的抗体依赖性增强作用,非感染性免疫复合物经FcγRIIB增强PRRSV的感染。本研究对于揭示PRRSV的感染分子机理和ADE作用机制具有重要意义。

论文目录

• 致谢
• 中文摘要
• 常用缩略词
• 文献综述一 病毒感染的抗体依赖性增强作用及其机制
• 文献综述二 PRRSV 研究进展
• 引言
• 试验一 PRRSV 实时定量PCR 检测方法的建立
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果与分析
• 4 讨论
• 试验二 PRRSV 疫苗样株和变异株的感染差异性研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果与分析
• 4 讨论
• 试验三 PRRSV 的抗体依赖性增强作用研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果与分析
• 4 讨论
• 试验四 经FcγRIIB 介导的PRRSV 的抗体依赖性增强作用试验
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果与分析
• 4 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• ABSTRACT
• 发表文章