泽泻的提取分离及其对SP2/0肿瘤细胞抑制作用的研究

论文摘要

中草药成分的抗癌潜力引起了各国研究人员的广泛兴趣。泽泻中的成分泽泻萜醇B乙酸酯可以诱导多种癌细胞凋亡并且能够恢复多药耐药性细胞系对抗肿瘤剂的敏感性,从而提高药物化疗的效果,因而在癌症治疗领域可能有较好的应用前景。除泽泻萜醇B乙酸酯外,泽泻中还含有多种与之结构近似的四环三萜类化合物,可能具有相同的效果。因此本文对泽泻的提取分离及其各提取组分的相关生物活性进行了研究。采用传统的渗漉-萃取-柱层析的提取分离方法,以及制备薄层层析法,超临界CO2萃取法对泽泻药材进行提取分离,得到一系列混合物组分。利用薄层色谱和高效液相色谱分析其组成,并对三种提取方法各自的优缺点进行了讨论。泽泻分离出的组分对SP2/O骨髓瘤细胞的抑制作用的研究采用噻唑蓝（MTT）染色分析法在490nm波长下测定吸光度值。实验结果表明,有三个提取组分的IC50值小于100μg/mL,抑制活性最好的是乙酸乙酯萃取物经过柱层析分离出的E-2组分,其IC50值为74.60μg/mL,但仍未能达到抗癌中药混合物的标准(对中草药混合成分而言,抗肿瘤剂应满足IC50＜40μg/mL)。通过细胞形态检验方法,对E-2组分的作用进行了近一步分析。结果表明泽泻提取组分对SP2/O肿瘤细胞有一定抑制作用,并且这种作用具有一定的剂量和时间依赖性,但抑制效果还达不到抗癌药物的标准。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 泽泻的化学成分、提取分离和生物活性
• 1.2.1 泽泻的化学成分
• 1.2.2 泽泻的分离方法
• 1.2.3 泽泻萜醇B乙酸酯的分析方法
• 1.2.4 泽泻提取物的活性研究
• 1.3 肿瘤细胞抑制作用研究概况
• 1.3.1 中药与癌症治疗
• 1.3.2 多发性骨髓瘤与SP2/0骨髓瘤细胞
• 1.3.3 抗肿瘤药物筛选方法
• 1.4 本文的研究思路
• 第2章 泽泻的提取和分离
• 2.1 引言
• 2.2 泽泻的传统方法提取分离
• 2.2.1 仪器和试剂
• 2.2.2 泽泻提取工艺路线
• 2.2.3 过程与结果
• 2.3 制备薄层层析分离
• 2.3.1 仪器设备
• 2.3.2 实验内容
• 2.3.3 结果与讨论
• 2.4 泽泻的超临界萃取
• 2.4.1 仪器设备
• 2.4.2 实验内容
• 2.4.3 结果与讨论
• 2.5 本章小结与讨论
• 第3章 泽泻提取成分对细胞的抑制作用研究
• 3.1 引言
• 3.2 仪器和试剂
• 3.2.1 细胞
• 3.2.2 仪器
• 3.2.3 试剂
• 3.2.4 溶液配制
• 3.3 实验内容
• 3.3.1 确定MTT法的操作条件
• 3.3.2 绘制细胞浓度标准曲线
• 3.3.3 药物抑制作用初步筛选
• 3.3.4 活性组分的进一步筛选
• 3.3.5 E-2组分的细胞抑制作用
• 3.4 小结与讨论
• 第4章 全文总结与展望
• 4.1 总结与讨论
• 4.2 展望
• 参考文献
• 附录
• 致谢