hTERC、PCNA及HPV在宫颈病变中的表达及意义

论文摘要

【目的】通过检测人端粒酶RNA （human telomerase RNA component,hTERC或hTR）和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）在不同病变宫颈液基细胞学（Thinprep cytologic test,TCT）标本和组织中的表达,结合高危型人乳头瘤病毒（high risk human papillomaviruses,HR-HPV）检测结果,分析hTERC、PCNA及HR-HPV的相关性,讨论其与宫颈癌发生、发展的关系及临床意义,为宫颈癌的早期诊断和治疗提供新的实验理论依据。【方法】分别收集宫颈上皮细胞内瘤变（cervical intraepithelia neoplasia, CIN）CINI、CINII、CINIII、浸润性宫颈癌（invasive cervical cancer, ICC）脱落细胞标本及相应的组织标本90例,其中CINI30例、CINII19例、CINIII 17例及ICC组织标本24例,以慢性宫颈炎症15例作为对照组。分别采用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization ,FISH）检测hTERC基因在CINI、CINII、CINIII、浸润性宫颈癌（invasive cervical cancer, ICC）脱落细胞标本中的表达;采用免疫组织化学S-P（Streptavidin-peroxidase）法检测PCNA在CINI、CINII、CINIII、浸润性宫颈癌（invasive cervical cancer, ICC）组织标本中的表达情况;HR-HPV检测采用杂交捕获Ⅱ代（hybridization capture-Ⅱ,HC-Ⅱ）的方法,取上述病人的宫颈分泌物标本,检测高危型HPV（HR-HPV）病毒的载量。【结果】1、hTERC基因在CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ、ICC中的阳性表达率逐渐增高;与慢性宫颈炎症组相比,hTERC基因在CINⅡ、Ⅲ、ICC中的表达增高,差异具有显著性（P<0.01）;CINⅠ、CINⅡ与ICC比较,hTERC的表达差异具有显著性（P<0.01）;而CINⅢ与ICC比较,hTERC基因的表达无显著性差异（P >0.05）。2、PCNA在CINⅡ、CINⅢ和ICC中的阳性表达率逐渐增高,与慢性宫颈炎症组比较,差异具有显著性（P<0.05）;CINⅠ与慢性宫颈炎症组比较,无显著性差异（P >0.05）。CINⅢ和ICC与CINⅡ比较,PCNA表达的阳性率增高,有显著性差异（P<0.05）;CINⅢ和ICC比较,PCNA表达的阳性率也存在显著性差异（P<0.05）。在早期浸润癌中,Ⅰa-Ⅰb和Ⅱa比较,PCNA表达的阳性率也存在显著性差异（P<0.05）。3、HR-HPV在宫颈CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、ICC宫颈分泌物中的阳性表达率逐渐增高,与慢性宫颈炎症组比较,差异具有显著性（P<0.01）;与CINⅠ比较,CINⅡ、CINⅢ与ICC HR-HPV的阳性表达率增强,存在显著性差异（P<0.01）。CINⅢ与ICC比较,其阳性表达率增强,但无显著性差异（P >0.05）。4、hTERC基因和PCNA蛋白及HR-HPV在宫颈病变中的表达随病变程度的增高具有逐步上升的趋势。采用Bivariate双变量相关分析,得出hTERC和PCNA及HR-HPV之间的相关系数分别为0.903和0.922（P<0.05）;PCNA及HR-HPV之间的相关系数rs为0.943（P<0.05）,三者之间存在高度相关。【结论】hTERC、PCNA及HR-HPV在CIN和ICC中显著高表达,可能为宫颈癌发展过程中重要的分子事件。hTERC和PCNA及HR-HPV联合检测可能为宫颈癌的早期诊断和治疗提供临床依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 主要试剂
• 1.1.2 实验用主要溶液
• 1.1.3 主要仪器
• 1.2 方法
• 1.2.1 研究对象
• 1.2.2 标本采集及处理
• 1.2.3 实验方法
• 1.2.4 统计学分析
• 2 结果
• 2.1 宫颈不同病变组织中 hTERC 基因的表达
• 2.1.1 hTERC 基因在TCT 标本中按组织学分组的表达情况
• 2.1.2 hTERC 基因在TCT 标本中按细胞学分组的表达情况
• 2.2 宫颈不同病变组织中PCNA 蛋白表达的情况
• 2.3 不同宫颈分泌物中 HR-HPV DNA 的阳性率
• 2.4 联合检测的可行性
• 2.5 变量间的相关
• 附图
• 3 讨论
• 3.1 HR-HPV 感染与CIN、宫颈癌的关系
• 3.2 hTERC 基因的表达与 CIN、宫颈癌的关系
• 3.3 PCNA 蛋白的表达与CIN、宫颈癌的关系
• 结论
• 参考文献
• 附录 综述
• 参考文献
• 致谢