血瘀体质理论及其外周血基因表达谱的研究

论文摘要

目的挖掘传统中医理论中血瘀体质的相关内容,总结近现代研究成果,补充中医血瘀体质的相关理论;检测血瘀体质的外周血基因表达谱,探索其基因表达特征,为防治血瘀体质相关疾病提供依据。方法采用传统文献梳理与现代文献分析的方法,进行中医血瘀体质理论研究。在临床流行病学调查的基础上,选择13例典型血瘀体质和30例典型平和体质受试对象,抽取空腹静脉血各10ml,分离白细胞,提取总RNA,纯化后进行单轮扩增,生物素标记cRNA,应用Illumina公司的Sentrix（?）Human-6 Expression BeadChip芯片检测基因表达谱。以平和体质作为对照,得出血瘀体质的差异表达基因,对差异表达基因进行GO注释和pathway分析,并对差异表达基因的生物学功能进行评价,从基因水平阐明血瘀体质成因、特征及其发病倾向性的机制。结果理论研究发现血瘀体质的形成受先后天多种因素的影响,多因先天遗传、年老、性别、跌扑损伤、内伤七情、饮食不节、劳逸过度以及久病等因素而形成;基因研究发现,当P<0.05时,血瘀体质与平和体质表达差异基因共592个位点,其中上调基因167个位点,下调425个位点;当P<0.001时,血瘀体质与平和体质表达差异基因共有96个位点,其中上调基因24个位点,下调基因72个位点。与平和体质相比,血瘀体质者血小板易凝集,易患缺血性疾病和肿瘤类疾病;血瘀体质者参与蛋白合成、核酸合成、类固醇激素合成等生物合成功能的基因表达下调,说明血瘀体质者生物合成与代谢功能有下降的趋势;血瘀体质者与基因转录相关的基因表达下调,说明血瘀体质者在遗传信息传递方面的功能可能呈现下降状态;而血瘀体质者部分与生长发育相关的基因表达下调,以及与二氢嘧啶脱氢酶、人甲基转移酶、蛋白精氨酸甲基转移酶、UDP葡萄糖焦磷酸化酶、转磷酸胆碱酶、1-磷酸半乳糖尿苷酸转移酶、钙蛋白酶、内酰胺酶等酶活性相关的基因下调,又揭示了血瘀体质者可能有生长发育下降的趋势。结论:血瘀体质理论体系对指导临床用药及养生保健具有重要意义。基因研究表明,与平和体质相比,血瘀体质者血小板易凝集,易患缺血性疾病和肿瘤类疾病;血瘀体质在生物合成与代谢功能、遗传信息传递方面的能力以及生长发育均有下降的趋势。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 英文缩略词表
• 前言
• 第一部分 文献综述
• 综述一 血瘀体质的现代研究进展
• 1 血瘀体质概念的提出
• 2 血瘀体质的特征
• 3 血瘀体质的形成因素
• 3.1 血瘀体质的形成与年龄有关
• 3.2 血瘀体质的形成与性别有关
• 3.3 血瘀体质的形成与地域有关
• 4 血瘀体质的兼夹情况
• 5 血瘀体质与疾病的相关性
• 6 血瘀体质的实验研究展望
• 7 结语
• 参考文献
• 综述二 基因芯片技术在中医体质学研究中的应用与展望
• 1 基因芯片技术在中医体质学研究中的应用
• 1.1 基因芯片技术在阳虚体质研究中的应用
• 1.2 基因芯片技术在痰湿体质研究中的应用
• 1.3 基因芯片技术在气虚体质研究中的应用
• 1.4 基因芯片技术在阴虚体质研究中的应用
• 2 基因芯片技术在中医体质学研究中的意义
• 2.1 有助于从微观上探讨体质本质
• 2.2 有利于建立量化的体质分类标准
• 2.3 为辨体治疗提供依据
• 3 展望
• 参考文献
• 第二部分 血瘀体质的理论研究
• 1 血瘀的概念
• 1.1 血行迟缓涩滞为血瘀
• 1.2 死血壅塞血脉为血瘀
• 1.3 血脉闭阻不通为血瘀
• 1.4 血液离经停积为血瘀
• 2.血瘀体质的特征与判定
• 2.1 体质特征表述
• 2.2 血瘀体质特征表述
• 2.3 血瘀体质的判定
• 3.血瘀体质的形成
• 3.1 先天因素
• 3.2 后天因素
• 4 血瘀体质的调体干预
• 4.1 调体方法
• 4.2 调体要点
• 5 血瘀体质的养生保健
• 5.1 饮食调养
• 5.2 起居调护
• 5.3 运动锻炼
• 5.4 精神调摄
• 6 血瘀体质与血瘀证的区别
• 6.1 界定前提不同
• 6.2 形成的主要因素不同
• 6.3 时相性不同
• 6.4 指向目标及诊察内容不同
• 6.5 干预目的不同
• 参考文献
• 第三部分 血瘀体质外周血基因表达谱的研究
• 1 受试人群的筛选与样本获取
• 1.1 受试人群纳入标准和排除标准
• 1.2 受试人群筛选结果
• 1.3 样本采集
• 2 仪器与试剂
• 2.1 仪器
• 2.2 试剂
• 3 实验方法
• 3.1 实验设计
• 3.2 实验步骤
• 3.3 数据处理
• 4 实验结果
• 4.1 基因信号值聚类分析
• 4.2 血瘀体质与平和体质的差异表达基因
• 4.3 血瘀体质与平和体质差异表达基因的分子生物学注释
• 5 差异表达基因的生物学功能评价
• 5.1 部份参与生物合成的基因
• 5.2 部分与基因表达过程相关的基因
• 5.3 部分与生长发育相关的基因
• 5.4 部分与酶活性相关的基因
• 5.5 部分与循环系统相关的基因
• 5.6 部分与肿瘤相关的基因
• 5.7 部分与免疫功能相关的基因
• 5.8 部分与细胞信号传导和物质运输相关的基因
• 5.9 部分与物质代谢相关的基因
• 6 讨论
• 6.1 血瘀体质者血小板易凝集
• 6.2 血瘀体质者易患缺血性疾病
• 6.3 血瘀体质者易患肿瘤
• 6.4 血瘀体质者差异基因其他生物学功能总结
• 参考文献
• 全文总结
• 1 血瘀体质的理论研究
• 2 血瘀体质外周血基因表达谱研究
• 3 创新点
• 致谢
• 个人简历
• 附录 血瘀体质与平和体质表达差异基因注释表