地榆抗过敏活性物质的研究

论文摘要

地榆（Sanguisorba officinalis），是蔷薇科（Rosaceae）地榆属（Sanguisorba L．）多年生草本植物，在我国东北、西北、华北、华南及广西有广泛分布。地榆中含大量的鞣质、三萜皂甙等药理活性成分，具有很强的开发价值。本实验以地榆为主要研究对象，以透明质酸酶抑制率来评价其抗过敏作用，通过溶剂提取、大孔树脂吸附分离、超滤膜分离、聚酰胺柱分离及凝胶柱分离等一系列分离纯化方法获得具有较高透明质酸酶抑制率的单体，并通过薄层鉴定、试管预测、紫外及红外光谱初步解析分离单体的化学结构。同时，测定了地榆粗提物的羟基自由基、过氧化氢和超氧阴离子自由基清除率，通过与透明质酸酶抑制率的对比，初步预测地榆的抗过敏作用机制。得到如下结论：确定了地榆抗过敏成分有效提取条件为60％乙醇，粉碎粒度为40-60目，提取温度50℃，料液比1：40，1h／次，共提取四次；大孔树脂可以有效的对抗过敏有效成分进行吸附分离，分离组分最高透明质酸酶抑制率可以达到76％；采用膜分离，聚酰胺分离及凝胶LH-20分离等纯化方法得到单体样品Ⅰ，透明质酸酶抑制率为89％(2mg·mL-1)，为地榆提取物中透明质酸酶抑制率最强的单体组分；样品Ⅰ在薄层层析板上遇三氯化铁显蓝色，遇茴香醛-硫酸显橙色，同时可以与明胶、溴水反应产生沉淀，使香草醛-盐酸变红，这些现象证明其为缩合单宁类物质，紫外，红外光谱也显示多酚特性。同时，地榆粗提物具有很强的氧自由基清除作用，地榆提取物大孔树脂40％乙醇洗脱组分与原花青素标准品具有相似的氧自由基清除作用，羟基自由基、过氧化氢和超氧阴离子自由基的清除率分别为98％，73％和45％。通过对比，地榆提取物的氧自由基清除率与透明质酸酶抑制率之间呈一定的正相相关性，推测地榆的抗过敏作用机制可能与其对各种自由基清除作用有关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 地榆简介
• 1.2 地榆的国内外研究状况
• 1.3 过敏性疾病
• 1.3.1 过敏性疾病的现状
• 1.3.2 过敏性机理和治疗概况
• 1.3.3 抗过敏活性的研究方法
• 1.4 天然产物的提取分离及鉴定方法
• 1.4.1 天然产物的提取方法
• 1.4.2 天然产物的分离方法
• 1.4.3 天然产物的鉴定方法
• 1.5 本研究的主要内容和目的
• 1.5.1 研究内容
• 1.5.2 研究目的
• 第二章 地榆抗过敏活性成分的提取、初纯化工艺研究
• 2.1 材料、试剂与设备
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 主要设备
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 地榆提取工艺条件的选择
• 2.2.2 提取液的萃取工艺流程
• 2.2.3 大孔树脂富集抗过敏有效成分
• 2.2.4 总酚含量的测定，采用Folin-Ciocalteau法
• 2.2.5 样品抗过敏活性检测: Elson-Morgan改良法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 浸提工艺的优化选择
• 2.3.2 抗过敏有效成分的萃取分离
• 2.3.3 大孔树脂对地榆抗过敏有效成分的纯化
• 2.3.4 大孔树脂纯化后最强组分的多酚含量
• 2.4 小结和讨论
• 第三章 地榆粗提取成分的抗氧化作用及与抗过敏的对比
• 3.1 实验材料，试剂与设备
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 实验药品、试剂
• 3.1.3 实验设备
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 羟基自由基的测定
• 3.2.2 过氧化氢清除实验
• 3.2.3 超氧阴离子自由基清除实验
• 3.2.4 透明质酸酶抑制率实验
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 地榆提取物清除自由基作用的分析
• 3.3.2 抗氧化与抗过敏的分析
• 3.4 结果与讨论
• 第四章 地榆抗过敏活性成分的纯化
• 4.1 材料、试剂和设备
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 实验药品、试剂
• 4.1.3 实验设备
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 膜实验确定有效成分的分子量组成
• 4.2.2 聚酰胺分离抗过敏成分
• 4.2.3 凝胶Sephadex LH-20分离抗过敏有效成分
• 4.2.4 高效液相色谱的分析
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 膜分离地榆抗过敏有效成分
• 4.3.2 聚酰胺对地榆抗过敏有效成分的分离
• 4.3.3 凝胶LH-20对地榆抗过敏有效成分的分离
• 4.3.4 分离样品I的HPLC分析
• 4.5 结果和讨论
• 第五章 地榆抗过敏成分化学性质的初步分析
• 5.1 实验材料、试剂及设备
• 5.1.1 实验材料
• 5.1.2 实验试剂
• 5.1.3 实验设备
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 薄层定性
• 5.2.2 单宁的试管预测
• 5.2.3 紫外吸收光谱扫描
• 5.2.4 红外吸收光谱扫描
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 薄层定性结果
• 5.3.2 试管预测结果
• 5.3.3 样品的紫外光谱分析
• 5.3.4 样品的红外光谱分析
• 5.4 结论
• 第六章 课题总结与研究展望
• 6.1 课题总结
• 6.2 研究展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士期间参与的科研项目与学术论文发表情况