论文摘要
目的:研究腺病毒介导的小鼠白细胞介素—12基因在体外对肝癌H22细胞生长的影响,以及在裸鼠体内对肝癌血管生成的抑制。 方法:（1）构建携带鼠白细胞介素—12基因的重组腺病毒,在体外转染H22细胞,荧光显微镜观测转染率,ELISA法检测细胞培养上清液中的鼠白细胞介素—12含量。（2）应用倒置显微镜、细胞计数法、改良MTT法、流式细胞仪观察重组腺病毒在体外对H22细胞生长的影响。（3）用携带鼠白细胞介素—12基因重组腺病毒转染的小鼠肝癌H22细胞作为实验组,以腺病毒转染的H22细胞和未转染的H22细胞为对照组,三种细胞分别被接种到裸鼠肾包膜下,观察肝癌H22细胞的生长以及肝癌血管的生成情况,RT-PCR法检测肝癌组织中的血管内皮细胞生长因子和血管生成素—2基因的表达情况。 结果:（1）成功构建携带鼠白细胞介素—12基因的重组腺病毒,感染复数为100、感染时间为2小时条件下重组腺病毒的转染率为96.41%,实验组细胞培养上清液中检测到鼠白细胞介素—12的含量为（89.71±22.05）ng.48h-1.106cells-1,对照组细胞培养上清液中未检测到鼠白细胞介素—12。（2）在体外,实验组和对照组H22细胞的大小、形态、生长增殖、细胞周期无差别（P>0.05）。（3）在裸鼠体内,摘除瘤组织时实验组瘤组织体积较小,出血较对照组少;实验组血管内皮细胞生长因子和血管生成素—2基因的PCR产物条带亮度均弱于对照组（P<0.05）;实验组血管内皮细胞生长因子的PCR产物条带辉度比值（0.8867±0.1924）低于载体对照组（1.1744±0.1189）和空白对照组（1.1874±0.1752）（P<0.05）;实验组血管生成素—2基因的PCR产物条带辉度比值（0.7878±0.1471）低于载体对照组（1.0319±0.1574）和空白对照组（1.0361±0.1536）（P<0.05）。 结论:（1）携带鼠白细胞介素—12基因的重组腺病毒构建正确,转染率较高,能高表达鼠白细胞介素—12蛋白。（2）体外实验,白细胞介素—12对H22细胞的生长无抑制作用。（3）在裸鼠体内,白细胞介素—12能抑制H22细胞的生长,抑制血管内皮细胞生长因子和血管生成素2基因的表达,从而抑制肝癌的血管生成,抑制肝癌细胞的生长。
论文目录
相关论文文献
- [1].mIL-12质粒对哮喘模型抑制性细胞因子的影响[J]. 中国现代医学杂志 2013(05)
- [2].HBx和mIL-12双基因重组腺病毒的构建[J]. 四川大学学报(医学版) 2010(06)
- [3].可诱导表达mIL-12单链融合蛋白的腺病毒载体的构建[J]. 实用医学杂志 2008(16)
标签：血管生成论文; 肝癌论文; 白细胞介素论文; 血管内皮细胞生长因子论文; 血管生成素论文;