聚合酶链反应—单链构象多态性技术快速检测耐多药结核分枝杆菌突变基因

聚合酶链反应—单链构象多态性技术快速检测耐多药结核分枝杆菌突变基因

论文摘要

耐药尤其耐多药问题是结核病治疗中的难题。异烟肼、利福平、链霉素是最重要的一线抗结核药物,及时了解结核病人对这些一线抗结核药物的耐药情况对指导治疗十分重要。为了解本地区结核病耐药基因突变情况,探讨PCR-SSCP 作为新的分子药敏试验方法在临床的应用价值,我们通过提取耐INH、RFP、SM 的肺结核患者痰中结核分枝杆菌DNA,并进行PCR-SSCP 分析,检测其结核分枝杆菌rpoB、katG、rpsL 基因是否存在突变,作为判定多重耐药的指标。实验结果证实,1、rpoB、katG、rpsL 基因突变与本地区结核杆菌对RFP、INH、SM 耐药性有关。通过PCR-SSCP 方法可检测出大部分耐多药结核病的耐药基因,有利于耐多药结核分枝杆菌耐药性的快速检测。2、与传统L-J 药敏实验对照,PCR-SSCP 敏感、特异、快速、简便,由于本法能直接检测患者痰标本,仅需2 天就可判定患者的结核分枝杆菌的耐药性,将成为临床指导用药的好方法。

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