丙戊酸钠及联合化疗药诱导分化治疗人脑胶质瘤实验研究

论文摘要

[目的]丙戊酸钠（Valproate,VPA）是多年来临床上经典的抗癫痫药物,近几年有学者发现其对多种肿瘤细胞都能产生一定的诱导分化作用,但单独应用或与细胞化疗药盐酸尼莫司汀（Nimustine,ACNU）联合应用对人脑胶质瘤体内疗效如何尚不确定。本研究旨在通过体内实验探讨两者对人脑胶质瘤的诱导分化作用,同时从本实验室先前基因芯片检测出的与胶质瘤诱导分化相关的28个候选基因中再次优选出差异显著的Tob基因以及诱导分化研究中的热点HDACl基因进行RT-PCR分析,为阐明丙戊酸的作用机制和进一步的基因治疗奠定基础。[方法]（1）将低分化人脑胶质瘤体外细胞系SHG-44移植于饲育在NASA 1000级生物净化室,按SPF级进行管理的NC裸小鼠皮下,制作成可移植性实体瘤模型。（2）单用VPA以及联合应用ACNU进行治疗,其中VPA组给予400mg/kg,每天一次,腹腔注射,共40天:ACNU组给予30mg/kg,每四天一次,腹腔注射,共四次;VPA+ACNU组首先腹腔注射.ACNLJ,用法同ACNLJ组,ACNU结束后继续腹腔注射VPA,剂量同VPA组;对照组（生理赫水）25ml/kg,每天1次,腹腔注射,共40天。（3）采用游标卡尺测量移植瘤生长速度;常规病理切片HE染色观察移植瘤的组织结构;流式细胞仪测定细胞增殖周期、GFAP表达:RT-PCR测定HDACl和Tob基因的表达。[结果]（1）对照组瘤块一直呈加速生长,甚至瘤块表面出现皮肤溃疡,ACNU组在治疗开始阶段能使瘤块体积有所缩小,与联合用药组无明显差别,但停药后一段时间肿瘤恢复快速生长,VPA组肿瘤生长速度介于ACNU组和对照组之间,肿瘤生长较缓和,无明显的生长加速期。病理切片上显示用药组肿瘤细胞密集程度明显降低,异形性下降,FCM表明瘤细胞G0/G1期比例上升,S期比例相对降低,GFAP表达量增加,说明VPA在体内有促使人脑胶质瘤细胞向良性分化的作用。（2）VPA联合化疗药ACNU,对胶质瘤生长的抑制作用更明显、更持久,瘤块体积明显缩小,仅在治疗后期才出现缓慢的生长,G0/G1期比例进一步上升,GFAP表达量增加更明显,其效果明显优于任何单独用药组。

论文目录

• 前言
• 第一部分:丙戊酸钠和盐酸尼莫司汀联合治疗可移植性人脑胶质瘤的实验研究
• 第二部分:丙戊酸钠与盐酸尼莫司汀的联合抗胶质瘤作用
• 结论
• 综述
• 发表文章
• 附录1 英文缩写词表
• 致谢
• 苏州大学硕士学位论文详细摘要