论文摘要
目的:研究烟碱是否对人脐静脉内皮细胞有损伤及黄芪的干预作用。方法:（1）采用MTT方法研究烟碱和黄芪对人脐静脉内皮细胞生长的影响。（2）采用ELISA方法检测各组细胞上清液中的ICAM-1、vWf、ET-1和P38MAPK、JNK、NF-κB的含量。（3）采用硝酸还原法检测各组细胞上清液中总一氧化氮的含量。（4）采用化学比色法检测各组细胞上清液中一氧化氮合酶的含量。（5）采用RT-PCR方法检测P38MAPK mRNA、NF-κBmRNA及JNK mRNA。结果:（1）烟碱浓度在10-3mol/L-10-5mol/L之间时,对人脐静脉内皮细胞都起损伤作用,尤以浓度为10-4mol/L的烟碱对人脐静脉内皮细胞的损伤最显著（P＜0.01）。（2）黄芪浓度在50μg/ml-200μg/ml之间时,均对人脐静脉内皮细胞起增殖作用,尤以浓度为200μg/ml时对细胞的增殖作用最显著（P＜0.01）。（3）与空白对照组相比,烟碱处理组细胞增殖能力显著降低（P＜0.01）,而黄芪处理组细胞增殖能力显著升高（P＜0.01）;烟碱处理组与烟碱和黄芪联合处理组相比有明显差异（P＜0.05）。（4）与空白对照组相比,烟碱处理组细胞培养上清液中的P38MAPK、JNK、NF-κB、ET-1、ICAM-1、vWf含量显著升高（P＜0.01）;与空白对照组相比,黄芪处理组的细胞培养上清液中的ET-1、vWf、P38MAPK、JNK、NF-κB、ICAM-1含量有显著降低（P＜0.01）;烟碱处理组与烟碱、黄芪联合处理组相比,ET-1、vWf含量明显升高（P＜0.05）。（5）与空白对照组相比,烟碱处理组细胞培养上清液中总NO含量显著降低（P＜0.01）;黄芪处理组总NO含量明显升高（P＜0.05）;烟碱处理组与烟碱和黄芪联合处理组相比,细胞培养上清液中总NO含量显著降低（P＜0.01）。（6）与空白对照组相比,烟碱处理组细胞中一氧化氮合酶含量显著降低（P＜0.01）;黄芪处理组一氧化氮合酶含量显著升高（P＜0.01）;烟碱处理组与烟碱和黄芪联合处理组相比,细胞中一氧化氮合酶含量明显降低（P＜0.05）。（7）与空白对照组相比,烟碱处理组细胞中的P38MAPK、JNK、NF-κB的mRNA表达显著上调（P＜0.01）。结论:（1）烟碱对人脐静脉内皮细胞有损害作用。（2）黄芪能保护内皮细胞,能减轻烟碱对其的损害。（3）烟碱对人脐静脉内皮细胞的损伤机制可能与烟碱通过与烟碱受体结合和激活MAPK和NF-κB两条信号转导通路有关。
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