紫花苜蓿黄酮的提取与纯化研究

论文摘要

紫花苜蓿中含有许多生物活性成分,如苜蓿皂苷、苜蓿黄酮、苜蓿叶蛋白等,黄酮是重要的一类,我们采用不同的方法,对紫花苜蓿黄酮的提取和纯化进行了系统的研究,以期为探究紫花苜蓿黄酮的生物学活性价值奠定基础。试验一:为了检测和计算紫花苜蓿提取物中黄酮的含量,以芦丁为对照品,根据硝酸铝显色原理,以吸光度A为横坐标,溶液浓度C为纵坐标,制作标准曲线: C=83.332A+0.3619,R=0.9993。结果表明:吸光度与浓度线性关系良好。试验二:本试验研究了不同浓度乙醇溶液对紫花苜蓿黄酮浸出率的影响,结果表明,30%乙醇对紫花苜蓿黄酮的浸出率最高,为4.55mg/g,随着乙醇浓度的升高,浸提液颜色逐渐加深,叶绿素等色素浸出率升高。试验三:本试验研究了不同pH条件下,水浸提对紫花苜蓿黄酮浸出率及所得提取物黄酮含量的影响,结果表明pH为7.5时,浸出率最高为4.87 mg/g,而pH在9.0时提取所得提取物黄酮含量最高为1.61%。试验四:本试验研究了不同存放条件及取样部位对苜蓿草粉中黄酮浸出率含量的影响。新鲜草粉黄酮最高浸出量总体上比室温条件下存放三个月的草粉高出0.188‰,而且总体水平上,新鲜苜蓿草粉黄酮浸出量均高于室温条件下存放三个月的苜蓿草粉;三个处理中叶片中黄酮含量比全草中黄酮含量分别高出1.53mg/g、0.86mg/g、1.16mg/g。试验五:本试验研究了不同型号大孔树脂对紫花苜蓿乙醇粗提取物中黄酮分离,结果表明:9种型号的大孔树脂中DS-17对紫花苜蓿黄酮有较好的分离效果,所得提取物黄酮为5.87%。试验六:本试验研究了不同酸度条件分离碱溶紫花苜蓿提取物中黄酮,结果表明: pH为2.2时,对紫花苜蓿黄酮有最好的沉淀效果,所得沉淀物中黄酮含量为9.80%。试验七:本试验研究了不同乙醇浓度分离碱溶酸沉提取物中苜蓿黄酮及辅助方法对紫花苜蓿黄酮分离的影响。结果表明:用60%的乙醇溶解酸沉物中黄酮有较好的效果,所得提取物中苜蓿黄酮含量为8.35%;采用超滤膜处理苜蓿草粉乙醇提取物后,所得到分离物中黄酮的含量为0.6%,比处理前低了1.05个百分点,而超滤膜处理后剩余提取物黄酮含量为2.44%,比处理前提高了0.79个百分点;离心处理后,提取物黄酮含量为2.07%,较处理前提高了0.42个百分点。试验八:本试验研究了大孔树脂对碱溶酸沉提取物中黄酮的分离,结果表明:三组试验中均为DM130对提取物中黄酮的分离效果最好,所得分离物黄酮含量最高分别为24.25%、72.15%和29.35%。试验九:本试验研究了夏季高温对大孔树脂吸附性能的影响,结果表明:经过夏季高温后,大孔树脂吸附性能降低,几种型号的大孔树脂中海D101对黄酮分离效果相对较好,所得提取物含量黄酮含量为8.69%。在分离过程中引入了新的杂质。试验十:本试验研究了不同有机溶剂萃取分离紫花苜蓿黄酮的效果,结果表明:采用乙酸乙酯及丙酮萃取,分别能将提取物中黄酮含量提高6.27和2.4个百分点,说明采用乙酸乙酯与丙酮萃取,能明显提高提取物中黄酮含量。

论文目录

• 致谢
• 中文摘要
• 1 文献综述
• 1.1 酮类化合物生物学活性的研究进展
• 1.1.1 黄酮类化合物的抗自由基和抗氧化作用
• 1.1.1.1 自由基的危害
• 1.1.1.2 黄酮类化合物的抗自由基及抗氧化活性
• 1.1.2 黄酮类化合物对心血管系统的作用
• 1.1.3 黄酮类化合物抑菌作用
• 1.1.4 黄酮类化合物对细胞凋亡和肝脏病变的影响
• 1.1.4.1 黄酮类化合物对细胞凋亡的影响
• 1.1.4.2 黄酮类化合物对病变细胞的凋亡的促进作用
• 1.1.4.3 黄酮类化合物对机体正常细胞的凋亡的抑制作用
• 1.1.4.4 黄酮类化合物对肝病的影响
• 1.1.5 黄酮类化合物对动物激素的调节作用
• 1.1.6 黄酮类化合物对免疫的影响
• 1.1.7 黄酮类化合物在畜牧生产中的应用
• 1.2 黄酮类化合物的提取与纯化研究进展
• 1.2.1 黄酮类化合物的提取
• 1.2.1.1 乙醇萃取法
• 1.2.1.2 甲醇萃取法
• 1.2.1.3 水浸提法
• 1.2.1.4 超声波辅助提取法
• 1.2.1.5 微波辅助提取法
• 1.2.1.6 超临界萃取法
• 1.2.1.7 酶解法提取黄酮类化合物
• 1.2.1.8 内部汽化法提取
• 1.2.2 黄酮类化合物的纯化研究进展
• 1.2.2.1 大孔树脂吸附
• 1.2.2.2 超滤膜分离
• 1.2.2.3 有机溶剂再萃取
• 1.2.2.4 聚酰胺树脂精制
• 1.2.2.5 碱溶酸沉法
• 1.2.2.6 葡聚糖凝胶法
• 3 引言
• 3.1 试验一：标准曲线的绘制
• 3.1.1 材料与方法
• 3.1.2 标准曲线
• 3.1.3 结果
• 3.2 试验二不同乙醇浓度对苜蓿黄酮提取率的影响
• 3.2.1 材料与方法
• 3.2.2 结果与分析
• 3.2.3 讨论
• 3.3 试验三不同pH 水溶液对苜蓿黄酮提取率的影响
• 3.3.1 材料与方法
• 3.3.2 结果与分析
• 3.3.3 讨论
• 3.4 试验四不同存放条件及取样部位对苜蓿草粉中黄酮浸出率含量的影响
• 3.4.1 材料与方法
• 3.4.2 结果与分析
• 3.4.3 讨论
• 3.5 试验五大孔树脂对乙醇粗提取物中黄酮分离的研究
• 3.5.1 材料与方法
• 3.5.2 结果与分析
• 3.5.3 讨论
• 3.6 试验六不同酸度条件分离碱溶苜蓿提取物中黄酮的研究
• 3.6.1 材料与方法
• 3.6.2 结果与分析
• 3.6.3 讨论
• 3.7 试验七乙醇浓度分离酸沉提取物中苜蓿黄酮及辅助方法对黄酮分离的影响
• 3.7.1 材料与方法
• 3.7.2 结果与分析
• 3.7.3 讨论
• 3.8 试验八大孔树脂对酸沉法初分离紫花苜蓿提取物中黄酮分离的研究
• 3.8.1 材料与方法
• 3.8.2 结果与分析
• 3.8.3 讨论
• 3.9 试验九夏季高温条件下对大孔树脂吸附性能的影响
• 3.9.1 材料与方法
• 3.9.2 结果与分析
• 3.9.3 讨论
• 3.10 试验十不同有机溶剂萃取苜蓿黄酮的研究
• 3.10.1 材料与方法
• 3.10.2 结果与分析
• 3.10.3 讨论
• 4 结论
• 5 展望
• 参考文献
• 英文摘要