论文摘要
【目的】南蛇藤素（celastrol）又名雷公藤红素（tripterine）,是从中药雷公藤根部提取的五环三萜类单体。大量的研究表明,南蛇藤素具有抗炎、抗氧化、抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。特别是近年来研究表明,南蛇藤素对炎症反应、免疫反应和氧化应激反应都具有重要的调控作用。动脉粥样硬化是一种慢性炎症过程。我们推测,南蛇藤素可能通过对炎症因子表达和细胞增殖的影响,发挥一定的抗动脉粥样硬化作用。本实验通过检测南蛇藤素对ApoE-/-小鼠血脂水平和动脉粥样硬化病变形成的影响,并研究动脉壁中C-反应蛋白（CRP）和斑块内CD40配体（CD40L）、组织因子（tissue factor, TF）、CD68和α-actin表达以及和胶原蛋白含量的改变,进一步探讨南蛇藤素对动脉粥样硬化病变形成的影响和机制。【方法】8周龄雄性ApoE-/-小鼠12只,随机分入南蛇藤素组（CeT组）或溶剂二甲基亚砜对照组（DMSO组）,每组各6只,并以同周龄雄性C57BL/6J小鼠6只为普通对照组（C57组）。均给与高脂（21%脂肪和0.21%胆固醇）饲养8周,在高脂饲养的后4周,CeT组小鼠给予南蛇藤素2mg.kg-1.d-1腹腔注射,DMSO组和C57组小鼠每日给予相当剂量DMSO腹腔注射。腹腔注射4周后麻醉小鼠,肝素抗凝,心脏穿刺取血,生化法测定血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇含量（LDL-C）含量。处死小鼠后,取小鼠主动脉和心脏,以石蜡包埋,行主动脉根部连续切片。以HE染色观察和测量动脉粥样硬化斑块的组织学特点及病变面积;免疫组化法检测主动脉壁内CRP、动脉粥样硬化斑块中CD40L、TF、巨噬细胞CD68和平滑肌细胞α-actin的表达;苦味酸-天狼星红染色检测斑块内胶原含量。以Image Pro Plus 6.0软件进行图像分析。【结果】1.高脂饲养使三组小鼠血脂发生了明显改变,且南蛇藤素对血脂代谢有显著的影响。高脂饲养条件下,DMSO组小鼠血清TC和LDL-C水平显著高于C57组（ P<0.05）,HDL-C的含量显著低于C57组小鼠（P<0.05）;CeT组与DMSO组相比,TC、LDL-C和HDL-C均有显著降低（ P<0.05）。2.与C57组相比,DMSO组小鼠主动脉形成动脉粥样硬化病变的初期改变,而C57组小鼠尚未形成动脉粥样硬化。CeT组与DMSO组相比,动脉粥样硬化病变程度减轻,主动脉根部斑块的横截面积减小（ P<0.05）,动脉粥样硬化斑块面积/血管壁横截面积比值有显著下降（ P<0.05）。3.与DMSO组相比,CeT组主动脉壁CRP表达显著减少,动脉粥样病变组织内CD40L、TF、CD68表达也显著减少;CeT组动脉粥样病变组织内胶原含量显著高于DMSO组（ P<0.05）;而平滑肌细胞α-actin表达在CeT组和DMSO组间相比无显著差异（ P>0.05）。【结论】1.南蛇藤素可以降低高脂饲养ApoE-/-小鼠血浆TC、LDL-C和HDL-C水平,显著减少主动脉粥样硬化病变面积。提示南蛇藤素对血脂代谢有一定改善作用,并且抑制动脉粥样硬化病变的形成。2.南蛇藤素可抑制动脉壁中CRP和动脉粥样硬化斑块内CD40L、TF和CD68的表达,稳定斑块内的胶原含量。提示南蛇藤素不仅可以通过减少动脉壁CRP表达而发挥抗炎症作用,还可通过减少斑块内CD40L和TF的表达,巨噬细胞的聚积,以及稳定斑块内胶原的含量,而达到稳定动脉粥样硬化斑块的作用。
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