新型抗心肌缺血/再灌注损伤药物的研究

论文摘要

心脑血管疾病是危害人类健康和生命的―第一杀手‖,死亡率高居第一。缺血性心脏病是罪魁祸首之一。尽早恢复血液灌注可阻止缺血性损伤的发展,但是短时间恢复缺血组织供血的绝大多数述疗法都存在心肌缺血/再灌注损伤的问题。治疗缺血性心脏病的临床常用药物主要有三大类:硝酸酯类、β受体阻滞剂和钙拮抗剂,联合用药也有一些报道。但是它们都不同程度的存在着不良反应或因易产生耐药性而不能长期连续使用。因此,研发新型高效、低毒的心肌缺血/再灌注损伤的药物具有重要的临床意义。研究目的1、设计合成兼具清除ROS和释放NO的新型抗心肌缺血/再灌注损伤的目标分子,研究其在大鼠心肌缺血/再灌注损伤过程中的药效作用,以期获得比现有NO供体药物ISMN具有更好心肌保护效果的结构。2、制备一种新型反相极性修饰色谱柱填料,为目标产物的药代动力学研究提供有效的分析工具。实验内容及结果1、设计合成了三个目标化合物:AcDI-302:用DCC,DMAP缩合法制备AcDI-302,总产率79%。AcGI-405:用酰氯和醇在碱性条件下键合成酯的方法制备AcGI-405,总产率64%。AcGI-406:用Mitsunobu法将ISMN的醇羟基转化为氨基,产率:50.3%,后再与酰氯在碱性条件下键合成酰胺的方法制备AcGI-406,总产率39%（以ISMN计算）。2、设计合成了一种反相极性修饰色谱柱填料,对色谱柱进行了性能评价及应用研究,获得了预期效果:（1）反相极性修饰色谱柱的制备:先将高纯硅胶与十八烷基二甲基氯硅烷反应制备C18键合固定相,再与极性修饰基团进一步反应得到极性修饰固定相。（2）极性修饰色谱柱的性能评价:Englhardt测试、Dolan测试结果均表明我们制备的极性修饰色谱柱有高选择性、高灵敏度和优秀的柱效。将同一样品连续进样3000次,过程中保留时间、峰形均无变化,说明我们制备的色谱柱填料性能稳定重现性好。（3）极性修饰色谱柱的应用用制备的极性修饰色谱柱考察以下六组不同类型的混合物在高水流动相和更宽泛的pH值条件下的分离效果,①4-氨基苯甲酸、山梨酸和苯甲酸混合物;②5类代表性生物碱混合物;③头孢菌素类抗生素;④伪麻黄碱和对乙酰氨基酚;⑤苯胺及其衍生物;⑥目标分子AcDI-302、AcGI-405、AcGI-406,均得到很好的分离结果。（4）将极性修饰色谱柱用于AcDI-302在体外模拟胃液、肠液中的药代动力学研究,在强内源性物质干扰的条件下得到了选择性高的分离效果,为我们下一步深入研究目标分子的药代动力学提供了有利的工具。3、AcDI-302对大鼠心肌缺血/再灌注的作用结果:制备大鼠心肌缺血30min,再灌注3h模型,采集心电图、±dP/dtmax、LVDP等血流动力学指标,以及大鼠MI/R后血清中CK、LDH、MDA、NO水平和心肌梗死面积等指标,整理后进行统计学分析,各组实验数据均表明我们设计合成的AcDI-302可显著减轻缺血再灌注造成的心肌损伤,改善缺血心脏功能,且AcDI-302的作用强于阳性对照药ISMN。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 1. 缺血性心脏病与临床常用药物
• 2. 硝酸酯类药物与心肌缺血/再灌注
• 3. 自由基清除剂与心肌缺血再灌注损伤
• 4. 自由基清除剂与硝酸酯类药物联合应用的研究
• 第一部分 目标化合物的合成工艺研究
• 1. 材料与仪器
• 1.1 试剂
• 1.2 试剂处理
• 1.3 仪器
• 2. 目标化合物合成工艺研究
• 2.1 单硝酸异山梨醇酯的制备
• 2.2 AcDI-302的合成
• 2.3 AcGI-405的合成
• 2.4 AcGI-406的合成
• 3. 讨论
• 3.1 AcDI-302的合成
• 3.2 AcGI-405的合成
• 3.3 AcGI-406的合成
• 第二部分 新型反相极性修饰色谱固定相的合成、柱性能分析及其在目标化合物在模拟胃液、肠液药代动力学研究中的应用
• 1. 极性修饰固定相的制备
• 1.1 实验材料
• 1.2 色谱固定相的合成
• 2. 色谱性能评价与应用
• 2.1 材料与仪器
• 2.2 装柱
• 2.3 柱性能的评价方法
• 2.4 实验结果
• 2.5 极性修饰色谱柱的应用
• 2.6 讨论
• 3. 极性修饰色谱柱对目标产物分离性能的研究
• 3.1 材料与仪器
• 3.2 色谱分析条件
• 3.3 分离效果
• 3.4 结论
• 4. 反相极性修饰色谱柱在药代动力学方面的应用
• 4.1 材料与仪器
• 4.2 样品溶液的配制
• 4.3 色谱分析条件
• 4.4 实验方法和结果
• 第三部分 ACDI-302的药效学研究
• 1. 材料
• 1.1 药品与试剂
• 1.2 实验仪器
• 1.3 实验动物
• 2. 实验方法
• 2.1 大鼠心肌缺血模型的制备
• 2.2 动物分组及给药情况
• 2.3 指标测定
• 3. 结果
• 3.1 心功能检测结果
• 3.2 血清CK、LDH 含量测试结果
• 3.3 血清NO、MDA含量测试结果
• 3.4 心肌梗死范围的确定
• 4. 讨论
• 总结
• 参考文献
• 附录
• 个人简历和研究成果
• 致谢