论文摘要
叶斑病是近年黑穗醋栗生产栽培中发生较严重的一种病害，主要侵染植物的叶片，初期在叶片上形成浅褐色水渍状斑点，稍后斑点变褐，后期病斑浅灰色或灰白色，斑点中心形成黑色孢子器，叶片变黄卷曲，提前脱落，从而引起黑穗醋栗产量及果实质量的下降。国内对黑穗醋栗叶斑病的发病症状仅有过记载，还没有相关的系统研究。本文对引起叶斑病病原菌的种类及其生物学特性进行了研究，并进行了防治药剂的筛选，从而为黑穗醋栗的抗叶斑病育种及病害的防治提供理论依据。本研究于2006年7月～2006年8月从黑龙江省海林市、桦川县、宾县和东北农业大学园艺试验站4个栽植地采集典型病样，采用组织分离法对叶片病斑进行分离及纯化。从培养基、温度、光照、pH值、湿度几个方面对病原菌的生物学特性进行研究，采用生长速率法和平板对峙培养法对防治药剂进行筛选。于显微镜下观察菌丝体结构和分生孢子形态发现：菌丝体呈树杈状伸展，白色，有隔膜；分生孢子器球形或近球形，器壁暗褐色，膜质；分生孢子线形，无色透明，正直或弯曲，顶端略尖，1～3个隔膜。按照柯赫氏法则回接到4～5片叶子的幼苗上，3个月后表现田间病害的初期症状。根据《真菌的形态和分类》和《中国真菌志》，确定分离的病原菌为壳针孢属（Septoria），属于半知菌亚门（Deuteromycetes）球壳孢目（Sphaeropsidales）球壳孢科（Sphaeropsidales）。病原菌在马铃薯葡萄糖琼胶培养基（PDA）上生长最好，6d长满培养皿（菌落直径90.0mm），且产孢均匀，培养12d产孢量为8.55×106个／mL，其次为燕麦片培养基和玉米粉琼胶培养基，病原菌在黑穗醋栗汁液培养基上生长最差，6d菌落直径仅为55.0mm，并且不产生孢子。适宜病原菌生长的温度范围为20～30℃，25℃为最适温度，此温度下的菌落直径和产孢量分别达到最大值；15℃病原菌生长不好，6d菌落直径仅为23.7mm，并且不产生孢子；30℃以上病原菌停止生长。适合分生孢子萌发的温度范围为20～30℃，25℃萌发最好，培养10h镜检萌发率达94％；温度为15℃或者高于40℃，培养24h镜检孢子萌发率仅为40％和5％。病原菌在全黑暗、全光照、12h光照-12h黑暗交替3种条件下生长速度没有很大差别，6d菌落直径均达到90.0mm；持续的光照不利于病原菌产孢，在全光照、12h光照-12h黑暗交替的2种条件下，培养12d的产孢量为4.20×106个／mL和2.87×106个／mL，而全黑暗的条件下为8.55×106个／mL。在培养初期光照似乎可以促进病原菌分生孢子的萌发，全黑暗、全光照、12h光照-12h黑暗交替的3种条件下培养2h孢子萌发率分别为0、10％和10％；而后期发现光照对分生孢子萌发影响不大，24h镜检孢子萌发率均达到95％以上。病原菌在pH值6.0～9.0的范围内生长速度没有差异性，6d菌落直径均达到90.0mm；最适pH值为7.0，此pH值的菌落直径和产孢量分别达到最大值。适合病原菌分生孢子萌发的pH值范围为5.0～7.0，pH值6.0时孢子萌发最好，培养24h镜检孢子萌发率达98％。病原菌的分生孢子在高湿度条件下萌发好，培养24h镜检孢子在90％湿度和水中的萌发率分别达到93％和97％，而在75％和60％的湿度下萌发率仅为76％和39％。对壳针孢菌防治效果较好的化学药剂为：福星（Flusilazole，7000～10000倍液）、三唑酮（Triadimefon，800～900倍液）、达科宁（Daotech，400～700倍液）和腈菌唑（Myclobutanil，1500～3000倍液），其中福星的抑菌效果最佳，抑菌率为75.4％～79.3％；防治效果较好的生物药剂有放线菌菌株2-17和世绿（validamycin A，1000～1600倍液），抑菌率分别为61.9％和37.8～44.8％。最佳混配组合及其配比比例为三唑酮+达科宁（2∶1）和福星+腈菌唑（3∶1），抑菌率分别达到86.4％和82.8％。