骨髓单个核细胞移植治疗扩张型心肌病的动物与临床研究

论文摘要

扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)是一种由多种因素导致的心肌细胞肥大变性、功能退化,继而发生弥漫性心肌纤维化、收缩功能减退的心肌疾病,随着病情进展,最终发展为全心腔扩大、充血性心力衰竭。其病因及发病机制尚不清楚,早期诊断比较困难,出现症状后病人病情常呈进行性恶化。DCM以心肌受累为主,特点是具有完整舒缩功能的心肌细胞数量减少。传统观点认为,成体心肌细胞是高度分化的终末细胞,不再具备增殖能力,因此认为这些损伤是不可逆的,缺乏有针对性的特效治疗,确诊者约1/4在一年内死亡,半数在5年内死亡,预后较差。随着干细胞技术的出现与成熟,将心外组织中具备分化潜能的各种干细胞导入,替代或再生心肌细胞,恢复心功能将成为最直接、最有效的途径。骨髓干细胞是多种细胞及组织的多潜能前体细胞,没有明确的形态学特征,为单个核细胞(mononuclear bone marrow cells,MBMCs),它具有自我更新和分化潜能,又能释放某些细胞因子促进血管新生。大量体外试验结果证实它在特定环境中能被诱导分化为心肌样细胞,诱导后细胞具有心肌特异性结构蛋白及电兴奋,可用来修复损伤坏死心肌。 研究目的:①动物试验:通过心肌直接注射的方法,使大量MBMCs进入DCM心肌坏死区,进行病损心脏的细胞及血管重建,评价MBMCs移植修复心肌、血管并恢复衰竭心脏心功能的价值,为MBMCs移植治疗DCM等弥漫性、非缺血性心肌损害疾病提供实验基础。②临床试验:收集终末期心功能不全的DCM患者,进行自体MBMCs移植,观察其疗效,并探讨其治疗最佳途径及改善远期预后的机制,为临床治疗DCM提供全新策略。 研究方法:①构建实验性大鼠DCM模型。近交系大鼠皮下注射大剂量异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO)(170mg/kg,1次/d,连续2d),喂养4周后,通过血流动力学、超声心动图检测,以及免疫组织化学、电镜检查,从不同方面证实模型制造成功。②抽取骨髓干细胞,分离纯化得MBMCs,用4’,6—二脒基—2—苯基吲哚(DAPI)标记后,以10μl悬液(含5×10~6个细胞)或10μl PBS直接心肌注射(左心室前壁,移植组/对照组),假手术组仅开、关胸。在移植后

论文目录

• 英文缩略词
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 综述
• 致谢