论文摘要
目的观察应用P13K抑制剂2-（4-吗啉基）-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4酮（LY294002）对胃腺癌细胞株SGC-7901中磷脂酰肌酸3-激酶（P13K）/丝氨酸苏氨酸激酶（AKT）信号通路的变化以及由此产生的细胞生长、侵袭及凋亡等方面的影响。方法应用LY294002作用于胃腺癌细胞株SGC-7901,通过Western Blotting检测PI3K/AKT信号通路中相关蛋白质P-AKT、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、细胞周期素（CyclinD1）的表达情况。噻唑蓝比色法（MTT）和流式细胞法及Transwell等实验评价胃腺癌细胞增殖、侵袭、凋亡等变化。结果1.Western blotting结果：与空白对照组和DMSO组相比,LY294002组能有效抑制P-AKT、MMP-2、MMP-9、Bcl-2、及CyclinD1蛋白的表达。2.MTT法检测细胞增殖活性：若以相对生存率表示细胞增殖活性,检测结果发现,与空白对照组和DMSO组相比,LY294002组白第2天起相对生存率明显下降,各时限三组细胞之间增殖率比较差别具有统计学意义（P<0.05）。3.Transwell侵袭实验表明：DMSO与空白对照组穿过上室的平均细胞数分别为（81.3±1.52）、（81.0±2.65）,而LY294002组穿过细胞数为（44.6±2.52）,三组的差异具有统计学意义（F=255.1,P=0.000）。4.细胞周期：结果显示对照组和DMSO组的G2/M期分别为19.3、19.6,S期分别为39.1、39,G0/G1期分别为41.6、41.4。LY294002组的G2/M期为15.2,S期为21.7,G0/G1期为63.1,差异具有统计学意义（P<0.05）,结果表明加入LY294002后,细胞周期阻滞在G0/G1期,延缓了细胞周期的进程,抑制了细胞增殖。5.细胞凋亡的检测：加入LY294002后,SGC-7901细胞凋亡数量明显增加,与DMSO组和空白对照组比较有统计学意义（F=149.66,P=0.000）。结论LY294002是一种对PI3K/AKT信号传导通路具有抑制作用的抑制剂,靶向P13K的LY294002可以有效抑制胃腺癌SGC-7901细胞的PI3K/AKT信号通路中相关蛋白质的表达,在体外显著抑制细胞的增殖、侵袭,并促进细胞的凋亡,因此为临床肿瘤防治提供了新思路,针对信号传导通路靶向治疗有望成为肿瘤治疗的新途径。
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