论文摘要
目的：观察螺内酯、依那普利及其联用对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的影响，探讨其可能的作用机制。方法：30只SD雄性大鼠随机分为5组，假手术组、UUO模型组、UUO+螺内酯组(50mg．kg-1．d-1)、UUO+依那普利组(31mg．kg-1．d-1)、UUO+螺内酯(50mg．kg-1．d-1)+依那普利组(31mg．kg-1．d-1)，术前1天起各组大鼠给予相应药物混悬液或生理盐水2ml灌胃，术后14天处死大鼠，取左肾组织行HE、Masson染色观察肾脏病理改变，并用免疫组化的方法检测肾皮质TGF-β1及FN表达；Western Blot法检测ColⅠ蛋白表达；检测各组大鼠血清肾功能、电解质生化指标。结果：（1）肾脏病理改变：①HE染色：UUO术后14天，部分肾小管明显扩张，上皮细胞变矮变平；部分肾小管萎缩，管腔缩小，闭合；肾间质炎症细胞浸润，间质面积增宽，纤维化程度明显增强。②Masson染色：运用图象分析法对肾间质纤维化改变进行半定量分析，各组蓝染面积百分比，分别为假手术组2.72±0.82，UUO组9.98±1.76，螺内酯组6.06±1.77，依那普利组6.48±1.24，两者联用组5.47±1.09；与假手术组比较，UUO组纤维化程度明显增加，差异具有统计学意义（P＜0.05）；各药物干预组与UUO组比较，纤维化程度明显减轻，其差异具有统计学意义（P＜0.05）；而各干预组之间纤维化程度两两比较，无统计学意义（P＞0.05）。以UUO组表达最强，两药联用组表达最弱。（2）免疫组织化学染色：运用图象分析法对肾小管间质TGF-β1、FN进行半定量分析。①TGF-β1的表达：各组TGF-β1在肾小管间质阳性表达百分比分别为：假手术组5.45±2.35，UUO组31.58±5.86，螺内酯组16.73±2.58，依那普利组16.20±2.36，两者联用组14.41±2.50，除螺内酯组与依那普利组之间的比较无统计学差异（P＞0.05）外，其它各组之间的比较均有统计学意义（P＜0.05），以UUO组表达最强，两药联用组表达最弱。②FN的表达：各组FN在肾小管间质的表达百分比分别为：假手术组3.82±0.92，UUO组17.06±2.08，螺内酯组8.46±1.64，依那普利组6.95±1.67，两者联用组7.64±1.20，与假手术组比较，UUO组FN的表达明显增加（P＜0.05）；各药物干预组与UUO组比较，FN的表达明显下调（P＜0.05），各药物干预组之间的比较无统计学差异（P＞0.05），以依那普利组表达最弱。③相关分析：各大鼠肾小管间质TGF-β1表达与FN的表达呈显著正相关（r=0.893，P＜0.05），与Masson染色纤维化面积呈显著正相关（r=0.787，P＜0.05）；各大鼠肾小管间质FN的表达与Masson染色纤维化面积呈显著正相关（r=0.805，P＞0.05）。（3）Western Blot显示，UUO术后14天，假手术组ColⅠ蛋白的表达很少，UUO及各药物干预组ColⅠ蛋白表达明显增高（p＜0.05）；与UUO组比较，各药物干预组ColⅠ蛋白表达明显下调，以两药联用组表达最弱（4）血生化指标：血钾浓度，UUO组及各药物干预与假手术组之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05），而两药联用与UUO组相比较，血钾浓度明显升高（P＜0.05）。血钠浓度，与假手术组相比较，两药联用组明显下降（P＜0.05）。血肌酐浓度，与假手术组相比较，UUO组及两药联用组肌酐比明显升高（P＜0.05），血尿素氮浓度，各实验组两两比较，无统计学差异（P＞0.05）。结论：1单侧输尿管结扎（UUO）可以快速建立肾间质纤维化动物模型。2 TGF-β1、FN和ColⅠ的表达增多与肾间质纤维化发生密切相关。3螺内酯通过下调肾脏TGF-β1的高表达，减少FN和ColⅠ在间质的沉积，阻止肾间质纤维化进展。其抗纤维化作用与ACEI相似。4醛固酮受体拮抗剂与ACEI联用对减轻肾间质纤维化具有协同作用。5两药联用的同时增加了血钾增高、肾功能减退的危险性，联用时须监测肾功能、血电解质。