论文摘要
目的 对青岛市流感病毒培养分离,对分离株进行分子生物学特性研究,为青岛地区流感的防治工作及疫苗的选择提供依据。 方法 本实验首先将采集的196份样品利用细胞培养和鸡胚接种法进行病毒分离;将分型的毒株分别利用RT-PCR方法扩增出其相应区域,并将扩增产物进行序列测定,与1998-2004年全国流行株代表株进行序列比较,分析其核苷酸序列和氨基酸序列的同源性,以及其变异情况。 结果 （1）本研究分离出流感病毒16株;经分型鉴定,H3N2亚型6株,H1N1亚型3株,B型7株。（2）分离出的16株流感病毒利用特异性引物,采用RT-PCR方法分别扩增出相应条带。（3）分离出的流感病毒与1998-2004年全国流感病毒流行株的代表株进行了核苷酸、氨基酸序列同源性比较。3株H1N1亚型流感病毒和1999-2004年全国流行株代表株A/New Caledonia/20/99（H1N1）的序列同源性较高;和1998-1999年全国流行株代表株A/Beijing/262/95（H1N1）的序列同源性较低。6株H3N2亚型流感病毒和1998-2000年全国流行株代表株A/Sydney/5/97（H3N2）的序列同源性较高;和2000-2004年全国流行株代表株A/Moscow/10/99（H3N2）的序列同源性较低。7株B型流感病毒与1998-2001年全国流行株代表株B/Beijing/184/93的序列同源性较低;与2001-2004年全国流行株代表株B/Shanghai/361/2002的序列同源性较高。 结论:（1）青岛地区2004-2005年间流感的发生和全国大的疫情发生趋势基本吻合,以H3N2亚型、B型居多,H1N1亚型较少。（2）H1N1亚型、B型流感病毒核苷酸序列、氨基酸序列未发生明显变异。H3N2亚型病毒核苷酸序列、氨基酸序列与1998-2004年全国流行株代表株A/Moscow/10/99（H3N2）的同源性相对较低,警示我们要加强监测力度,密切关注其变异情况,及时发现新型变异株。（3）此实验结果对青岛地区流感的防治工作具有重要的意义,为流感疫苗株的挑选提供了重要的参考依据。
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