论文摘要
目的:1、观察游离脂肪酸（FFAs）对体外培养的βTC-3细胞膜表面G蛋白偶联受体40（GPR40）表达及胰岛素分泌功能的影响。2、应用盐酸吡格列酮干预FFAs作用下的βTC-3细胞,观察盐酸吡格列酮能否改善或逆转FFAs介导的GPR40表达及胰岛素分泌异常的改变。方法:1、体外培养βTC-3细胞,不同浓度FFAs（0.25mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L ）分别干预12、24、48小时,放射免疫法检测胰岛素浓度,RT-PCR方法检测GPR40mRNA表达的变化。2、不同浓度吡格列酮（0.1μmol/L、1.0μmol/L、10.0μmol/L）分别干预未经FFAs处理的βTC-3细胞持续48小时,放射免疫法检测胰岛素,RT-PCR方法检测GPR40mRNA表达的变化。3、应用不同浓度吡格列酮（0.1μmol/L、1.0μmol/L、10.0μmol/L）分别作用于1.0mmol/L FFAs培养的βTC-3细胞48小时,放射免疫法检测胰岛素浓度,RT-PCR方法检测GPR40mRNA表达的变化。结果:1、在同一干预时间,随着FFAs浓度在0.25mmol/L～1.0mmol/L范围内的增加,βTC-3细胞GPR40表达下调;在相同浓度FFAs干预组内,随时间在12～48小时的延长,βTC-3细胞GPR40表达亦下调。FFAs对GPR40下调作用具有浓度、时间依赖性。2、FFAs对βTC-3细胞胰岛素分泌的影响:（1）随着干预时间由12至48小时依次延长,0.25mmol/LFFAs干预组βTC-3细胞的基础胰岛素分泌（BIS）呈增加趋势;（2）0.5 mmol/LFFAs干预组βTC-3细胞BIS呈先增加后下降的趋势;（3）1.0mmol/LFFAs干预组βTC-3细胞BIS则呈下降趋势;（4）随着FFAs浓度的增加和干预时间的延长,βTC-3细胞的葡萄糖诱导的胰岛素分泌（GSIS）则呈下降趋势。3、单独应用吡格列酮孵育βTC-3细胞,GPR40表达及胰岛素分泌功能均无变化。4、不同浓度吡格列酮与FFAs共同干预βTC-3细胞,随着吡格列酮浓度在0.1μmol/L～10μmol/L范围内的增加,βTC-3细胞的GPR40 mRNA表达和胰岛素分泌水平逐渐增加。结论:1、高水平FFAs能够下调βTC-3细胞GPR40的表达,损害细胞胰岛素分泌功能。且在一定浓度范围内,FFAs对细胞的损害存在明显量效、时间效应。2、吡格列酮能够改善高水平FFAs作用下βTC-3细胞的胰岛素分泌功能和GPR40表达的异常,在一定浓度范围内吡格列酮保护作用具有浓度依赖性。3、高水平FFAs对βTC-3细胞胰岛素分泌功能的损害和吡格列酮的保护作用可能与两者对GPR40表达的调节有关。
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标签：细胞论文; 胰岛素分泌论文; 噻唑烷二酮类药物论文; 吡格列酮论文;