口服DNA疫苗pcDNA3.1+/flk-1n1-7抗大肠癌血管生成的实验研究

论文题目: 口服DNA疫苗pcDNA3.1+/flk-1n1-7抗大肠癌血管生成的实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 普通外科学

作者: 陈明清

导师: 郭永章,李立

关键词: 口服,疫苗,大肠癌,抗血管生成,转移

文献来源: 昆明医学院

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:制备抗肿瘤血管生成口服DNA疫苗pcDNA3.1+/flk-1n1-7,研究该疫苗抗BALB/c小鼠大肠癌生长和转移的作用,并探讨其可能的作用机制。方法:1.提取BALB/c胎鼠总RNA,采用RT-PCR技术扩增出VEGFR2胞外cDNA全长序列flk-1n1-7,以质粒pcDNA3.1（+）为载体,构建成重组质粒pcDNA3.1+/flk-1n1-7,经脂质体介导将其转染COS-7细胞,并用Western blot方法检测其蛋白表达。2.将pcDNA3.1+/flk-1n1-7转化感受态减毒沙门氏菌SL3261,制备成以SL3261为载体的口服DNA疫苗。3.将小鼠分为疫苗组、空质粒组和生理盐水组,两周内各口服接种三次后,用CT-26细胞建立结肠癌皮下动物模型,观察小鼠的中位生存期。4.将小鼠分为疫苗组、空质粒组和生理盐水组,两周内各口服接种三次后,用CT-26细胞建立结肠癌皮下动物模型;流式细胞仪分别于接种疫苗前、接种疫苗后、接种CT-26细胞后测血液CD3+值和CD8+值;接种CT-26细胞28天后处死全部小鼠,取出肿瘤,称重,测体积,免疫组织化学法计数肿瘤微血管密度,透射电镜观察细胞超微结构变化,观察疫苗对小鼠CT-26细胞皮下肿瘤的抑制作用。5.将小鼠分为疫苗组、空质粒组和生理盐水组,两周内各口服接种三次后,从脾脏下极包膜内接种CT-26细胞,建立结肠癌肝脏转移动物模型;记录小鼠的体重变化;流式细胞仪分别于接种疫苗前、接种疫苗后、接种CT-26细胞后测血液CD44v值;接种CT-26细胞15天后处死全部小鼠,取出肝脏和脾脏,称重,测体积,病理学检查,体视学计数肝脏肿瘤转移灶个数,观察疫苗对小鼠肝转移的抑制情况。结果:1.成功地克隆出VEGFR2胞外cDNA序列flk-1n1-7;构建成重组质粒pcDNA3.1+/flk-1n1-7,测序证实与GenBank公布的小鼠VEGFR2胞外序列一致,Western blot法检测到flk-1n1-7在COS-7细胞中的蛋白表达。2.成功地将pcDNA3.1+/flk-1n1-7转化了减毒沙门氏菌SL3261,制备成以SL3261为载体的口服DNA疫苗pcDNA3.1+/flk-1n1-7。3.皮下动物模型显示:疫苗组小鼠的中位生存期

论文目录:

中文摘要

英文摘要

引言

第一部分重组质粒pcDNA3.1+/flk-1_(n1-7)的构建

材料

方法

结果

讨论

结论

第二部分口服DNA疫苗pcDNA3.1+/flk-1_(n1-7)的制备

材料

方法

结果

讨论

结论

第三部分口服DNA疫苗pcDNA3.1+/flk-1_(n1-7)抗大肠癌的实验研究

材料

方法

结果

讨论

结论

参考文献

中文详细摘要

英文详细摘要

附录1 中英文缩略词表

附录2 主要溶液的配制

致谢

综述

发布时间: 2005-12-07

参考文献

[1].TEM8在NSCLC中的表达及其作用机制的研究[D]. 龚泉.昆明医科大学2018
[2].肿瘤细胞中iASPP抑制ROS的作用及其分子机制研究[D]. 葛文杰.哈尔滨工业大学2018
[3].TIPE1抑制胃癌肿瘤血管生成的作用及机制研究[D]. 刘为民.暨南大学2018
[4].以Tie2为靶标的抗肿瘤血管生成的研究[D]. 廖振林.中国人民解放军军事医学科学院2004
[5].肿瘤细胞向血管外游走过程中内皮细胞功能调控的研究[D]. 辛华.吉林大学2004
[6].基质金属蛋白酶-2C端片断PEX克隆、表达及其抑制肿瘤的作用[D]. 许传杰.吉林大学2004
[7].抑制COX-2表达对逆转膀胱癌恶性生物学行为的影响[D]. 秦军.第四军医大学2005
[8].三羟异黄酮对光动力学疗法抗肿瘤治疗的增效作用及机制研究[D]. 蒋凯.第三军医大学2005
[9].猪Endoglin DNA疫苗诱导抗肿瘤血管生成机理研究[D]. 焦解歌.中南大学2005
[10].炎症因子与膀胱癌发生的关系[D]. 胡毅.吉林大学2006

口服DNA疫苗pcDNA3.1+/flk-1n1-7抗大肠癌血管生成的实验研究

猜你喜欢