肾上腺髓质素对AngII诱导人血管平滑肌细胞增殖及细胞KATP通道mRNA表达的影响

肾上腺髓质素对AngII诱导人血管平滑肌细胞增殖及细胞KATP通道mRNA表达的影响

论文摘要

目的:观察肾上腺髓质素(ADM)对AngⅡ诱导人肠系膜动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞KATP通道mRNA表达的影响,以探讨ADM舒张血管及降血压作用机制。方法:1.血管平滑肌细胞的分离,培养:选取开腹手术正常血压患者肠系膜动脉来培养的三至四代VSMC作为标本供实验用。2.VSMC鉴定:用光学显微镜和免疫细胞化学的方法鉴定细胞。3.实验分组:将培养的人肠系膜动脉平滑肌细胞分别分为:空白对照组(不加干预);干预对照组:ADM组(ADM10-7mol/L、ADM10-8 mol/L、ADM10-9 mol/L、ADM10-7mol/L+Glyburide);干预组:AngⅡ组(AngⅡ10-6 mol/L,以下同)、AngⅡ+ADM10-7mol/L、AngⅡ+ADM10-8mol/L、Ang 11+ ADM10-9 mol/L、Ang 11+ADM10-7mol/L+Glyburide).4.检测方法:采用MTT法检测平滑肌细胞增殖情况,抽提细胞总RNA,逆转录为cDNA,以实时荧光RT-PCR法检测各组细胞SUR2B/Kir6.1mRNA表达量。5.数据处理:用SPSS13.0软件包;计量数据用均数±标准差(x±s)表示,组间对比采用t检验、多组对比采用方差分析进行统计处理,检验水准为P<0.05有统计学意义。结果:1.培养的细胞经过光学显微镜和免疫细胞化学染色的方法鉴定为平滑肌细胞,纯度95%以上。2.ADM在基础状态下对血管平滑肌细胞的增殖无明显抑制作用。ADM各浓度组(10-7mol/L、10-8mol/L、10-9mol/L)的OD值与空白对照组比较无显著性差异(P>0.05)。3.ADM呈浓度依赖性地抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖,ADM各浓度组OD值明显低于AngⅡ组(P<0.05),OD值随ADM浓度的增加而减少,各浓度组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。4.AngⅡ组SUR2BmRNA表达量较空白对照组明显减少。ADM呈浓度依赖性拮抗AngⅡ的抑制作用,提高SUR2BmRNA表达量。特异性KATP拮抗剂Glyburide拮抗ADM的作用,减少SUR2BmRNA表达量。各组Kir6.1mRNA表达量无统计学差异。结论:1.ADM对基础状态下血管平滑肌细胞增殖无明显地抑制作用,但呈浓度依赖性对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞的增殖有一定地抑制作用,表明ADM对应激状态下的血管平滑肌细胞增殖有一定地抑制效应;2.ADM呈浓度依赖性拮抗AngⅡ的作用,增加原代培养人肠系膜动脉平滑肌细胞KATP通道中SUR2B亚基mRNA表达量,提示ADM通过增加人肠系膜动脉平滑肌细胞KATP通道表达,舒张血管,这可能是ADM降低血压的机制之一。

论文目录

  • ATP通道mRNA表达的影响'>1 肾上腺髓质素对AngⅡ诱导人血管平滑肌细胞增殖及细胞KATP通道mRNA表达的影响
  • 1.1 中文摘要
  • 1.2 英文摘要
  • 1.3 前言
  • 1.4 材料与方法
  • 1.5 结果
  • 1.6 讨论
  • 1.7 结论
  • 1.8 参考文献
  • 1.9 英汉缩略词对照表
  • 2 致谢
  • ATP通道与其心血管病相关研究(综述)'>3 管平滑肌KATP通道与其心血管病相关研究(综述)
  • 参考文献
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