论文摘要
第一部分重组治疗性hIGF-Ⅰ促心梗大鼠心肌细胞再生、延缓老化的研究目的:应用重组治疗性类人胰岛素样生长因子Ⅰ（hIGF-Ⅰ）注射于心梗大鼠皮下,检测反映心肌细胞增殖的相关指标,探讨相互间关系,为组织工程基因治疗心力衰竭奠定基础。方法:成功构建急性心梗模型1d后,随机分实验组和对照组（n=18）,设假手术组12只,实验组每天60ug/kg.d-1皮下注射重组治疗性hIGF-Ⅰ,对照组和假手术组注射生理盐水,分别于术后1、2、4周处死动物,留取标本。RT-PCR检测心肌组织rIGF-ⅠmRNA及TERTmRNA表达,ELISA试剂盒检测血浆、心肌组织中rIGF-1和hIGF-1浓度。免疫组化检测心肌细胞细胞周期素依赖性激酶4抑制蛋白（p16INK4a）、抑癌基因p53、细胞核增殖抗原（PCNA）及pKi67蛋白表达。结果:①实验组和对照组血浆rIGF-1浓度较同期假手术组均显著降低（p<0.01）,对照组降低更显著;实验组和对照组心肌组织rIGF-1含量较同期假手术组均显著增高（p<0.01）,第2周达峰值,实验组增高更显著。②重组治疗性hIGF-Ⅰ治疗1周后,实验组心肌组织均能检测到hIGF-1,假手术组及对照组未检测到,两者有显著差异（p<0.01）。③心梗后第1周实验组和对照组心肌组织rIGF-1mRNA表达较假手术组明显增高（p<0.01）,第2周达峰值,实验组增高更显著;第4周对照组与假手术组无显著差异（p>0.05）,但实验组较假手术组仍有显著差异（p<0.01）。④实验组和对照组端粒酶催化亚基基因（TERTmRNA）表达呈逐渐升高趋势,和假手术组比较有显著差异（p<0.01）,实验组增高更显著。⑤实验组和对照组p16INK4a表达在第1周达峰值,较假手术组有显著差异（p<0.01）,以对照组更显著;自第2周始实验组与假手术组无显著差异（p>0.05）;但对照组在第4周较假手术组仍有显著差异（p<0.01）。⑥实验组和对照组PCNA表达逐步增高,较假手术组有显著差异（p<0.01）,以实验组更显著。⑦实验组和对照组pki67表达逐步增高,较假手术组有显著差异（p<0.01）,以实验组更显著。⑧实验组和对照组p53在第1周升高达峰值,然后迅速下降,第4周仍高于假手术组,较假手术组均有显著差异（p<0.01）,以对照组增高更明显。⑨假手术组术后上述各项指标组内比较均无差异（p>0.05）。结论:重组治疗性hIGF-Ⅰ促进全身其他组织rIGF-Ⅰ分泌同时,还能在心肌组织局部聚集,在心梗早期明显抑制心肌细胞内p16INK4a及p53蛋白表达,促进PCNA、pKi67蛋白表达,明显促进rIGF-ⅠmRNA及TERTmRNA表达,有助于增强端粒酶活性,促进心肌细胞增殖,延缓细胞老化,为组织工程基因治疗心力衰竭提供理论依据。第二部分重组治疗性hIGF-Ⅰ对心梗大鼠心功能的影响目的:应用重组治疗性类人胰岛素样生长因子Ⅰ（rhIGF-Ⅰ）注射于心梗大鼠皮下,检测对心室重构及心功能的影响,为基因治疗心力衰竭奠定基础。方法:成功构建急性心梗模型1d后,随机分实验组和对照组（n=18）,设假手术组12只,实验组每天皮下注射重组治疗性hIGF-Ⅰ60ug/kg.d-1,对照组和假手术组注射生理盐水,分别于植入后1、2、4周处死动物,留取标本。行心脏形态学、心脏超声心动图、血液动力学检测。结果:①实验组和对照组血浆rIGF-1浓度较同期假手术组均显著降低（p<0.01）,对照组降低更显著;实验组和对照组心肌组织rIGF-1含量较同期假手术组均显著增高（p<0.01）,第2周达峰值,实验组增高更明显。②重组治疗性hIGF-Ⅰ治疗1周后,实验组心肌组织均能检测到hIGF-1,假手术组及对照组未检测到,两者有显著差异（p<0.01）。③实验组和对照组左室体重比较假手术组明显增高,有显著差异（p<0.01）,以对照组更明显;对照组和实验组组内各小组间无显著差异（p>0.05）。④对照组和实验组心肌梗塞面积变化无显著差异（p>0.05）。⑤实验组和对照组心肌细胞平均横截面积较假手术组明显增高,但只有第2周实验组与假手术组之间、对照组的第4周与第2周之间有显著差异（p< 0.01）,其他各组之间比较无显著差异（p>0.05）。⑥实验组和对照组左室射血分数和短轴缩短率均较同期假手术组明显下降,对照组降低更明显,有显著差异（p<0.01）。对照组和实验组组内各小组间比较无显著差异（p>0.05）。⑦实验组和对照组体动脉平均压较同期假手术组明显下降,对照组降低更明显,均有显著差异（p<0.01）。对照组各小组间比较无差异（p>0.05）。实验组各小组随时间延长呈逐渐升高趋势,第2周较第1周明显升高,有显著差异（p<0.01）;第4周较第2周有差异（p<0.05）。⑧实验组和对照组左室舒张末压均较同期假手术组明显升高,对照组升高更明显,有显著差异（p<0.01）。随着时间延长,对照组和实验组内各小组均呈逐渐下降趋势,除实验组的第4周较第2周有差异（p<0.05）外,其他各小组依次比较均有显著差异（p<0.01）。⑨实验组和对照组左室压力微分正最大变化值均较同期假手术组明显下降,对照组降低更明显,有显著差异（p<0.01）。实验组和对照组左室压力微分负最大变化值均较同期假手术组明显升高,对照组升高更明显,有显著差异（p<0.01）。⑩假手术组术后上述各项指标组内比较均无显著差异（p>0.05）。结论:重组治疗性hIGF-Ⅰ促进全身其他组织rIGF-Ⅰ分泌同时,还能在心肌组织局部聚集,能有效改善心室重构和心脏收缩舒张功能,为基因治疗心力衰竭提供理论依据。
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相关论文文献
- [1].携带hIGF-Ⅰ基因的腺病毒载体构建[J]. 江苏医药 2009(02)
- [2].hIGF-Ⅰ基因增强Mosaicplasty技术重建膝负重区大面积骨软骨复合缺损实验研究[J]. 中华老年骨科与康复电子杂志 2019(05)
- [3].腺病毒介导的hIGF-Ⅰ基因转染对构建组织工程软骨的影响[J]. 江苏医药 2009(01)
- [4].转基因家蚕丝腺组织和转化家蚕培养细胞表达hIGF-Ⅰ[J]. 中国科学(C辑:生命科学) 2009(07)
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