论文摘要
目的：观察db/db小鼠脂肪组织锌alpha2糖蛋白（Zinc-alpha2-glycoprotein，ZAG）及线粒体生物合成相关因子的表达水平，探讨罗格列酮对脂肪组织ZAG及线粒体生物合成相关因子表达的影响。方法：8周龄SPF级雄性db/m小鼠14只作为对照组，8周龄SPF级雄性db/db小鼠28只，随机分为糖尿病模型组和罗格列酮组，每组14只。罗格列酮组予以罗格列酮10mg/kg/day灌胃4周和8周，其余各组予以等体积生理盐水灌胃4周和8周。每天测量小鼠饮水量，每3天测量小鼠摄食量，每周测小鼠空腹血糖及体重。于给药4周末和8周末，分别处死小鼠。10%水合氯醛腹腔麻醉，眼球取血，分离血清，-20℃保存备用。分离睾周及肾周脂肪组织，液氮速冻后-80℃保存。应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western-blotting技术，检测小鼠内脏脂肪组织ZAG及线粒体生物合成相关因子过氧化物酶增殖型受体γ辅助活化因子1α（PGC-1α），核呼吸因子1（NRF-1），核呼吸因子2（NRF-2）及线粒体转录因子A（mtTFA）的表达水平。留取部分新鲜脂肪组织置于10%甲醛溶液HE染色，光镜观察。结果:自发性糖尿病db/db小鼠的摄食量、饮水量、体重增加值、内脏脂肪量、体脂比、血清空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）水平均明显高于非糖尿病db/m小鼠。脂肪细胞体积明显大于非糖尿病db/m小鼠，脂肪组织ZAG及线粒体生物合成相关因子PGC-1α、NRF-1、NRF-2、mtTFAmRNA和蛋白的表达均明显低于非糖尿病db/m小鼠。罗格列酮干预db/db小鼠4周或8周后除血清TC水平无明显变化外，上述其它指标均有不同程度改善。结论：罗格列酮可改善db/db小鼠的糖脂代谢，且能够通过上调ZAG及线粒体生物合成相关因子PGC-1α、NRF-1、NRF-2、mtTFA的mRNA和蛋白表达，减少内脏脂肪积聚。目的：建立高脂喂养的营养性肥胖小鼠模型，观察ZAG过表达时肥胖小鼠脂肪组织线粒体生物合成相关因子的表达，探讨ZAG与线粒体生物合成之间的关系。方法：4周龄清洁级雄性C57BL/6小鼠43只，适应性饲养1周后随机分成2组：普通饲养（Nomal food，NF）组10只和高脂饲养（High-fat food，HF）组33只。普通饲养组给予基础饲料，高脂饲养组给予高脂饲料。每3天测一次体重及摄食量并记录。饲养10周后对两组小鼠体重进行数据统计，选择高脂饲养组中造模成功的小鼠随机分为3组：高脂饲养组、ZAG过表达组和空白质粒组，每组10只，三组均给予高脂饲料喂养。营养性肥胖小鼠模型建立后进行2周干预试验。ZAG过表达组予以pcDNA3.l（-）-mZAG质粒25μg和lipofectamine2000脂质体40μL混匀后小鼠尾静脉注射，空白质粒组予以pcDNA3.1（+）质粒进行尾静脉注射，均隔日1次，共2周。干预两周后小鼠处死，留取血清，生化法测定空腹血糖、血脂相关指标，酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清ZAG及游离脂肪酸（FFA）含量；留取附睾周围脂肪组织称重，取适量脂肪组织固定于10%甲醛溶液中，制成石蜡切片、HE染色；应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western-blotting技术，检测小鼠附睾周围脂肪组织ZAG及线粒体生物合成相关因子（PGC-1α、NRF-1、NRF-2及mtTFA）的表达。结果:高脂饲养可致小鼠出现明显腹型肥胖，体重增加，体脂比升高，血清空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、FFA水平均显著升高，血清ZAG水平下降，脂肪细胞体积增大，且睾周脂肪组织ZAG及线粒体生物合成相关因子PGC-1α、NRF-1及mtTFA mRNA和蛋白的表达均明显低于普通饲养组小鼠；ZAG过表达可使营养性肥胖小鼠体重减轻，体脂比下降，内脏脂肪积聚减少，血清FBG、TC、LDL及FFA水平降低，线粒体生物合成相关因子PGC-1α、NRF-1、mtTFAmRNA和蛋白的表达均增加。结论：ZAG能够减轻营养性肥胖小鼠的体重，减少内脏脂肪积聚，可能与ZAG促进线粒体生物合成相关因子（PGC-1α、NRF-1及mtTFA）的表达有关。
论文目录
相关论文文献
- [1].锌alpha2糖蛋白与非酒精性脂肪性肝病[J]. 国际病理科学与临床杂志 2013(04)
- [2].褶纹冠蚌alpha2巨球蛋白基因的分子克隆与序列分析[J]. 水生生物学报 2010(02)
- [3].罗格列酮对db/db小鼠脂肪组织锌alpha2糖蛋白及线粒体生物合成相关因子表达的影响[J]. 中国现代医学杂志 2013(29)