川芎嗪对早期胚胎发育和植入过程中IL-6表达的影响

论文摘要

目的：检测盐酸川芎嗪处理小鼠妊娠着床期的孕激素和雌激素、子宫和胚胎白细胞介素-6（interleukine-6，IL-6）的表达情况，观测盐酸川芎嗪对体外胚胎早期发育的影响，评估盐酸川芎嗪对早期妊娠的安全性。方法：从妊娠第1天开始，将妊娠小鼠分为3个用药组，按0.067mg／g换算，以不同浓度的盐酸川芎嗪（10mg／d.ml，2mg／d.ml，0.4mg／d.ml）持续灌胃，连续4天，同时设立对照组，灌胃酸性生理盐水，分别于第4天和5天取血，测血清中孕酮（Progesterone，P）和雌二醇（estradiol，E2）浓度；同时第5天取子宫，通过免疫组化和逆转录聚合酶链式反应分析IL-6蛋白和IL6mRNA的表达情况；取第6天的子宫观测胚胎数和胚胎与子宫的发育情况。另取妊娠2-细胞、4-细胞和8-细胞的胚胎，用高中低浓度的盐酸川芎嗪（20ug／ml，2ug／ml，0.2ug／ml）进行体外培养，设立对照，观察胚胎发育情况。结果：第4天用药组小鼠血清雌二醇浓度与对照组相比无明显差异（P＞0.05），用药组血清孕酮浓度与对照组相比差异显著升高（P＜0.05～P＜0.01）；第5天的高浓度用药组血清雌二醇浓度与对照组相比显著升高（P＜0.05），各用药组孕酮浓度与对照组相比均显著降低（P＜0.05～P＜0.01）。第6天中浓度胚胎数与对照组相比差异显著减少（P＜0.05），低浓度组和高浓度组与对照组相比无明显差异（P＞0.05）；低浓度组与对照组相比胚胎发育无明显差异，中浓度和高浓度与对照组相比胚胎发育迟缓。在体外培养的胚胎中，高浓度组、中浓度组和低浓度组与对照组相比能明显抑制2-细胞、4-细胞的发育；对于8-细胞的发育，4个组之间无明显差异（P＞0.05）。免疫组化显示，低浓度组与对照组相比，IL-6蛋白表达表达无明显差异（P＞0.05），然而中浓度组与高浓度组IL-6表达显著降低（P＜0.05与P＜0.01）。但各浓度组间IL-6 mRNA的表达量无明显差异。结论：盐酸川芎嗪在体内，可通过降低血清孕酮、升高雌二醇浓度和减弱子宫上皮IL-6蛋白表达，使胚胎发育迟缓、子宫血液循环受阻；在体外能阻抑2-细胞、4-细胞和8-细胞的发育。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一部分 文献综述及本题意义
• 一.早期胚胎发育与着床
• 二.IL-6与着床关系
• 三.川芎嗪研究概况与目的意义
• 第二部分 材料与方法
• 一、实验材料
• 1.实验动物与分组
• 2.主要实验仪器
• 3.实验试剂及耗材
• 二、实验方法
• 1.放射免疫测定血清激素
• 2.免疫组织化学
• 3.早期小鼠胚胎的体外培养
• 4.IL-6mRNA的RT-PCR
• 第三部分 结果
• 一、川芎嗪对妊娠小鼠第6天胚胎数和子宫形态的影响
• 二、川芎嗪对妊娠第4、5天小鼠血清孕酮和雌二醇浓度的影响
• 1.盐酸川芎嗪对妊娠第4、5天血清中P浓度的影响
• 2浓度的影响'>2.盐酸川芎嗪对妊娠第4、5天血清中E₂浓度的影响
• 3.盐酸川芎嗪作用下妊娠第4、5天小鼠血清孕酮与雌二醇的比值
• 三、盐酸川芎嗪对小鼠子宫IL-6表达的影响
• 四、盐酸川芎嗪对小鼠子宫IL-6mRNA表达的影响
• 五、盐酸川芎嗪对小鼠早期胚胎发育的影响
• 1.盐酸川芎嗪对小鼠早期2-细胞胚胎发育的影响
• 2.盐酸川芎嗪对小鼠早期4-细胞胚胎发育的影响
• 3.盐酸川芎嗪对小鼠早期8-细胞胚胎发育的影响
• 第四部分 讨论
• 参考文献
• 附录
• 致谢