ICAM-1、VCAM-1在大鼠颈动脉损伤后再生内皮细胞的表达及其意义

ICAM-1、VCAM-1在大鼠颈动脉损伤后再生内皮细胞的表达及其意义

论文摘要

目的:探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在大鼠颈动脉损伤后再生内皮细胞的表达,进而研究血管内皮损伤后管腔狭窄形成的机制。方法:健康Wistar大鼠40只(动物中心提供),雄性,体重300-350 g,随机分为4组,观察损伤后4个时相点(1,7,14,28天),每个时相点n=10。随机化原则解剖出一侧颈总动脉,用自制木夹(13 mm×5 mm×1 mm)沿与动脉平行方向钳夹颈总动脉,持续钳夹25 min后松开,对侧颈动脉只加解剖,不加损伤,作为对照。分别于饲养第1,7,14,28天后摘除目标血管段以免疫组化法进行细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1表达水平检测,用HE染色切片分别测定动脉内膜、中膜厚度及管腔面积。结果:血管损伤后7天新生内膜形成并继续增厚,损伤后14天新生内膜显著增厚(P<0.05),损伤后28天较14天无明显变化(P>0.05);损伤后7天时管腔面积均无显著差异(P>0.05),14-28天时管腔面积明显减小(P<0.05),损伤后各时相点中膜厚度无明显变化。由免疫组化染色切片可见,细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1在损伤后7天和14天表达最高(P<0.05)。结论:血管内膜损伤后,内皮细胞再生对内膜进行修复,然而内膜的过度增生也造成了管腔的狭窄;以免疫组化法检测,光学显微镜见胞浆及胞膜上棕黄色颗粒,即为细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1,损伤术后7天和14天表达最高,明显高于假手术侧,细胞间黏附分子-1、血管细胞黏附分子-1可作为区别正常内皮细胞和再生内皮细胞的标志。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 引言
  • 第一章 材料与方法
  • 1.材料
  • 1.1 研究对象分组、动物模型的制作和标本的收集方法
  • 1.2 仪器和试剂
  • 1.2.1 仪器
  • 1.2.2 主要试剂
  • 1.2.2.1 一抗
  • 1.2.2.2 免疫组织化学染色试剂盒
  • 1.2.2.3 DAB显色剂
  • 1.3 方法
  • 1.3.1 实验前准备
  • 1.3.2 防脱载玻片制备
  • 1.4 标本的处理
  • 1.5.1 常规HE染色
  • 1.5.2 检测ICAM-1、VCAM-1在再生血管内皮细胞的表达
  • 1.6 设立对照
  • 1.7 结果判定
  • 1.8 统计学处理
  • 第二章 结果
  • 2.1 HE染色结果分析
  • 2.2 ICAM-1、VCAM-1免疫组化染色结果
  • 第三章 讨论
  • 第四章 结论和展望
  • 参考文献
  • 附图
  • 论文综述
  • 参考文献
  • 攻读学位期间的研究成果
  • 致谢
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