论文题目: 猪圆环病毒2型感染对猪免疫功能影响的细胞与分子机制
论文类型: 博士论文
论文专业: 预防兽医学
作者: 司兴奎
导师: 杨汉春
关键词: 猪圆环病毒型,外周血单个核细胞亚群,细胞因子,流式细胞术,体液免疫
文献来源: 中国农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)被认为是引起猪断奶后多系统衰竭综合征的原发性病原。本研究系统分析了PCV2实验感染猪外周血中单个核细胞亚群、细胞因子mRNA的动态变化,并分析了PCV2感染对猪瘟疫苗免疫效果的影响,旨在从细胞与分子水平揭示PCV2感染对猪免疫功能影响的机制。 建立了IL-2、IL-4、IL-10、IL-12p40、IFN-γ和TNF-α等6种细胞因子的竞争定量PCR(qc-PCR)的标准竞争曲线,并获得相关系数(r~2)均在95%以上的直线回归方程。采用qc-PCR对PCV2感染猪外周血淋巴细胞的细胞因子进行定量分析。结果表明,感染组(n=3)Th1细胞分泌的细胞因子IL-2、IL-12p40和IFN-γ的mRNA整体趋势上均高于对照组(n=2),Th2细胞分泌的细胞因子IL-4和IL-10的mRNA的变化情况却不尽相同。在14和21PI,感染组IL-2和IL-12p40 mRNA含量明显升高;感染组IFN-γ mRNA含量除在7DPI低于对照组外,在28DPI(P<0.01)和42DPI(P<0.05)均显著高于对照组。IL-4 mRNA在28DPI显著高于对照组(P<0.01),而IL-10 mRNA在7DPI(P<0.01)和14DPI(P<0.05)均显著高于对照组,但在35DPI急剧下降且明显低于对照组(P<0.05)。从6种细胞因子mRNA变化提示PCV2感染可造成猪体内Th1/Th2免疫应答的失衡,导致细胞免疫应答功能增高而体液免疫应答下降。 采用血常规方法和三色流式细胞术对PCV2感染猪外周血单个核细胞(PBMC)亚群含量进行了分析。结果表明,感染组B细胞含量在28DPI(P<0.01)和35DPI(P<0.05)显著下降,单核细胞含量在35DPI(P<0.05)显著高于对照组;感染组NK细胞含量在21DPI低于对照组(P<0.01);感染组T细胞在21DPI(P<0.05)和42DPI均显著升高(P<0.05)。对T细胞亚群含量变化的分析结果显示,Tc细胞除在10DPI明显低于对照组外(P<0.05),在21DPI(P<0.05)、35DPI(P<0.05)和42DPI(P<0.05)均显著高于对照组;感染组记忆/激活Th细胞含量在10DPI显著减少(P<0.05);而感染组幼稚型Th细胞则在21DPI(P<0.05)显著升高,随后在28DPI(P<0.05)又明显下降。由此表明PCV2感染可降低猪的体液免疫功能,感染初期对机体的特异性细胞免疫功能有一定程度的影响,感染中期猪的非特异性细胞免疫功能明显削弱。 将试验猪分成单独接种猪瘟疫苗组(CSF-V)、PCV2感染组(PCV2)、PCV2感染并出现病毒血症后接种猪瘟疫苗组(PCV2/CSF-V)和PCV2感染同时接种猪瘟疫苗组(CSF-V/PCV2),采用阻断ELISA检测不同时相血清中猪瘟疫苗抗体。结果表明,在52DPI,CSF-V/PCV2组血清中抗体的阻断值显著低于CSF-V组(P<0.05);在42和52DPI,PCV2/CSF-V和CSF-V/PCV2组猪瘟抗体效价均明显低于CSF-V组,且在52DPI,CSF-V组抗体阳性率达100%,而PCV2/CSF-V和CSF-V/PCV2的抗体阳性率仅为67%。由此表明,PCV2感染可在一定程度上抑制猪瘟疫苗免疫的抗体反应,从而影响猪瘟疫苗的免疫效果。 综上结果表明,PCV2感染可导致猪体内Th1/Th2细胞分泌的细胞因子失衡,并降低B细胞含量而减弱机体的体液免疫应答水平,同时对猪的非特异性免疫功能也产生一定影响,使感染猪的整体免疫功能受到抑制。
论文目录:
摘要
Abstract
目录
插图与附表清单
缩略词表
第一章 引言
1.1 国内外研究现状
1.2 研究目的与意义
1.3 研究内容与技术路线
1.4 研究目标
第二章 猪IL-2、IL-4、IL-10、IL12p40、IFN-γ及TNF-α竞争定量RT-PCR标准曲线的建立
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.3 结果与分析
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 猪圆环病毒2型感染对猪外周血淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-10、IL-12p40、IFN-γ及TNF-α mRNA转录的影响
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.3 结果与分析
3.4 讨论
3.5 小结
第四章 猪圆环病毒2型感染对猪外周血单个核细胞亚群含量的影响
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.3 结果与分析
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 猪圆环病毒2型人工感染猪血清抗体及组织中病毒相对含量的动态分析
5.1 前言
5.2 材料与方法
5.3 结果与分析
5.4 讨论
5.5 小结
第六章 猪圆环病毒2型感染对猪瘟疫苗免疫应答的影响
6.1 前言
6.2 材料与方法
6.3 结果与分析
6.4 讨论
6.5 小结
第七章 结论
第八章 创新点
第九章 文献综述-猪圆环病毒2型致病的细胞与分子机理研究进展
9.1 猪圆环病毒2型感染对外周血单个核细胞及组织中淋巴细胞含量的影响
9.2 猪圆环病毒2型感染对外周血单个核细胞和淋巴组织中细胞因子的影响
9.3 猪圆环病毒2型感染后血清中病毒含量的变化规律
9.4 猪圆环病毒2型感染后血清中病毒抗体的变化规律
9.5 猪圆环病毒2型人工感染后复制PMWS的情况
9.6 猪圆环病毒2型在组织细胞和胚胎中的分布
9.7 猪圆环病毒2型的持续性感染
9.8 猪圆环病毒2型感染导致免疫抑制的机制
9.9 展望
参考文献
致谢
附录
作者简介
发布时间: 2005-07-18
参考文献
- [1].核定位信号肽介导猪圆环病毒2型Cap蛋白出核机制的研究[D]. 侯强.中国农业科学院2018
- [2].猪圆环病毒2型灭活疫苗（YZ株）的研制及免疫效力评价[D]. 潘杰.扬州大学2018
- [3].生物反应器悬浮培养PK-15细胞生产猪圆环病毒2型灭活疫苗及其质量评价研究[D]. 刘俊斌.扬州大学2018
- [4].PCV2 Cap蛋白羧基端氨基酸残基的功能性研究[D]. 湛洋.湖南农业大学2017
- [5].规模化自繁自育猪场猪圆环病毒2型血清学调查及对母猪、生长育肥猪生产性能的影响[D]. 李瑞香.甘肃农业大学2016
- [6].猪圆环病毒2型的分子流行病学研究[D]. 温立斌.中国农业大学2005
- [7].猪圆环病毒Ⅰ型、Ⅱ型全基因克隆及其基因交换重组的研究[D]. 朱玲.四川农业大学2005
- [8].猪圆环病毒2型地方株的分离鉴定和诊断方法的建立及应用[D]. 曲连东.南京农业大学2006
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