论文摘要
目的:研究两株肝癌细胞SMMC-7721和HepG2的放射敏感性差异及γ射线照射后两细胞株Survivin蛋白的表达、Caspase-3的活性及细胞周期的变化。分析Survivin蛋白表达与肝癌细胞放射敏感性之间的关系及其机制,为临床肝癌的放疗增敏提供新的靶点及有力的理论依据。方法:肝癌细胞HepG2和SMMC-7721在接受不同剂量γ射线照射后采用克隆形成实验绘制两细胞的剂量存活曲线;用流式细胞仪分析照射前后细胞周期的变化;应用免疫细胞学方法测定照射前后两细胞Survivin蛋白的表达;采用比色法检测两细胞株在照射后72小时Caspase-3的活性度。结果:HepG2的D0、Dq、N值分别为1.57、0.86、1.73;SMMC-7721的D0、Dq、N值分别为1.81、1.72、2.61,HepG2细胞的放射敏感性高于SMMC-7721细胞。γ射线可诱导两株肝癌细胞发生G2/M期阻滞,其中SMMC-7721的G2/M期阻滞时间较HepG2细胞长（48h vs 24h）,在阻滞峰各剂量点的G2/M期比例也更高。而阻滞解除后SMMC-7721比HepG2有更多比例的细胞转入下一个细胞周期G0/G1期。两株肝癌细胞在照射前均表达Survivin蛋白,且核内比胞浆中更强。γ射线可上调两株细胞Survivin蛋白的表达,在照射后48～72小时,SMMC-7721细胞的Survivin蛋白表达明显高于HepG2细胞。在γ射线照射后72小时,两肝癌细胞均有Caspase-3的激活,且其活性均随照射剂量的增加而增加,HepG2细胞在各个剂量点Caspase-3的活化度均高于SMMC-7721细胞。结论:HepG2细胞的放射敏感性高于SMMC-7721细胞。照射可诱导两株细胞Survivin蛋白表达上调,其中SMMC-7721细胞的Survivin蛋白表达、G2/M期阻滞均强于强于HepG2细胞,而Caspase-3的活化度则较弱。Survivin可能通过其周期特异性表达和对Caspase-3的负调控参与肝癌细胞的放射抵抗。
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