川芎嗪和siRNA沉默TGF-β1对大鼠肝星状细胞CTGF表达的影响

论文摘要

目的:研究川芎嗪及化学合成的siRNATGF-β1对大鼠肝星状细胞CTGF表达的影响，为探寻治疗肝纤维化的新方法提供理论依据。方法：体外培养大鼠肝星状细胞，从3条siRNATGF-β1中筛选一条有效的基因沉默片段，然后利用脂质体转染试剂共同转染培养24h的细胞作为转染组（S），并设计空白对照组（B）、转染试剂组（R）、川芎嗪组（T）及联合治疗组（S+T）。收集孵育72h的HSC及培养上清液，采用RT-PCR法、Westernblot分别检测细胞I、III型胶原及CTGFmRNA的表达、CTGF蛋白表达，ELISA法检测培养上清液中I、III型胶原含量。结果：1.RT-PCR检测显示：与空白对照组相比，转染组I、III型胶原及CTGFmRNA表达分别下调（19±3%、32±2%、14±4%，p<0.05-0.01），川芎嗪组分别下调（30±2%、51±2%、25±3%，p<0.05-0.01），联合治疗组分别下调（37±5%、56±3%、36±3%，p<0.05-0.01）。空白对照组和转染试剂组比较，两组I型胶原mENA表达差异无显著意义（p>0.05）。2.Western印迹法检测显示：与空白对照组相比，转染组、川芎嗪组及联合治疗组，CTGF蛋白表达分别下调（16.2±3%、25.2±3%、41.6±4%，p<0.05-0.01）。3.ELISA法检测显示：与空白对照组相比，培养上清液中I型胶原胶原含量分别降低（6.1±5%、12±6%、15±5%，p<0.05-0.01），III型胶原胶原含量分别降低（13±3%、24±4%、41±2%，p<0.05-0.01）。结论：siRNA沉默TGF-β1基因能下调CTGF的表达，减少I、III胶原的表达。川芎嗪也能下调CTGF的表达，但对I、III型胶原表达的抑制作用更加显著，提示川芎嗪抗肝纤维化可能是多种作用靶点。

论文目录

• 符号说明
• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 问题与展望
• 全文小结
• 参考文献
• 附图
• 文献综述
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文目录