中国青刺参和日本红刺参苗种培育的生物学研究

论文摘要

刺参（Apostichopus japonicus）是我国重要的经济养殖种类,具有极高的经济价值。本文分别研究了我国青刺参和日本红刺参苗种培育的生物学特征及杂交育种。主要结论如下:1温度和盐度对青刺参幼虫生长和存活的影响在4个温度梯度（18,21,24和27℃）和8个盐度梯度（10,15,20,25,30,35,40和45‰）条件下,分别研究了温度和盐度对刺参摄食前及摄食后幼虫存活和生长发育的影响。结果表明:（1）摄食前和摄食后幼虫生长和存活的适宜温度为21-24℃;温度超过其适宜范围时,幼虫的存活率显著下降。（2）60 h内,受精卵能够正常发育至初耳幼虫的盐度范围为20-35‰;盐度过高或过低时,幼虫发育畸形或死亡;幼虫在自然海水盐度（30‰）时的存活率、变态率和生长速度皆最高。2不同附着基与环境因子对青刺参幼虫附着变态的影响分别对不同附着基、微生物粘膜以及组织提取液对刺参幼虫附着变态的影响进行了试验研究。附着基分别采用透明波纹板、塑料薄膜和网片。结果表明:不同附着基间刺参幼虫附着变态效果差异极显著（P < 0.05）,透明波纹板是刺参适宜附着基,幼虫的变态率最高。另外,微生物粘膜可以显著的促进幼虫的附着变态（P < 0.05）,富含硅藻的粘膜幼虫变态率最高,其次是富含EM益生菌的粘膜和普通微生物粘膜,未经处理的附着基幼虫变态率最低。同种组织提取液也对幼虫的附着变态起到显著的诱导作用（P < 0.05）。分析了温度、盐度和光照等环境因子对刺参幼虫附着变态的影响。实验分别设置了4个温度梯度（18,21,24和27℃）,4个温度盐度（20,25,30和35‰）,以及3种光照（蓝色、绿色和黑色）。结果表明,刺参附着变态的适宜温度为18-21℃,且幼虫变态率随温度升高而增大;当温度超过适宜范围（> 24℃）时,幼虫的变态率随着温度升高而减小;温度对幼虫附着变态的影响极为显著（P < 0.001）。幼虫附着变态的适宜盐度为30‰;盐度的升高或降低对幼虫附着变态的影响极显著（P < 0.001）。光照对幼虫附着变态的影响显著（P < 0.05）,较弱的光照更适宜刺参幼虫的附着变态。3不同营养添加剂对青刺参生长的影响对螺旋藻、EM益生菌、低聚糖和多维等添加剂在刺参苗种生长中的作用进行初步探索。结果表明:螺旋藻、海参多维和低聚糖均能促进刺参苗种的生长,实验组苗种的质量增长率显著高于空白对照组;EM益生菌的投喂效果低于空白对照组,其最适添加量有待进一步的研究。投喂各种不同的添加剂对2月龄刺参苗种的脏壁比没有明显影响,均在0.13-0.15之间。4密度、温度和盐度对日本红刺参幼虫生长和存活的影响分别分析了密度、温度和盐度对日本红刺参摄食前和摄食后幼虫生长和存活的影响,为大规模人工育苗确立红刺参苗种适宜生长的环境条件。结果表明:摄食前幼虫在育成密度为0.5-1.0个/ml时日生长、出苗量、育成成活率最高;摄食后幼虫的适宜育成密度为0.1-0.2个/ml;随着育成密度增加,幼虫存活率和生长速度呈下降趋势。摄食前和摄食后幼虫在21-24℃时存活率最高,生长最快;温度过高,促进幼虫的生长,但存活显著下降;温度过低,幼虫的存活和生长均显著下降。幼虫适宜的盐度为30‰;随着盐度的升高和降低,幼虫生长和存活率下降,畸形和死亡率上升。5日本红刺参盐度耐受性的研究将日本红刺参的稚参分别在3个温度梯度（21℃,24℃和27℃）和3个盐度梯度（32‰,27‰和22‰）组成的9个温、盐度结合组中暂养20 d,然后以渐变的方式对刺参的盐度耐受性进行研究。结果表明:稚参的SSMax、SSMin、50% CSMin和50% CSMax值均与暂养盐度成正相关,与暂养温度成负相关。双因子方差分析显示,温度和盐度以及温盐度的共同作用都对稚参的存活影响显著（P≤0.001）。6刺参杂交子一代的微卫星和AFLP分析本研究利用中国当地刺参（♀）和日本红刺参（♂）进行了杂交试验,并使用用微卫星和AFLP标记分析了杂交子一代的遗传特性。微卫星标记对两亲本及其杂交子代的分析结果表明,杂交子代的等位基因均来自两亲本,为真正的杂交种。8对AFLP引物共扩增出375个位点,其中多态位点265个,多态位点比例69.8%;238个位点在子代中发生分离,符合孟德尔分离规律的位点175个,其中母本69个,父本66个;偏离孟德尔分离的位点43个;异常分离位点20个。子一代与母本间的遗传距离为0.0391,小于其与父本之间的遗传距离（0.0999）,表明杂交子代在遗传上与母本较近。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 第一节 刺参生物学及养殖生态学研究进展
• 1 概述
• 2 生物学特性
• 3 养殖生态学
• 3.1 影响刺参生长及成活的因素
• 3.2 我国刺参养殖产业的现状
• 4 存在的问题及展望
• 第二节 海洋无脊椎动物幼虫的附着变态的研究进展
• 1 影响因素
• 2 研究进展
• 2.1 物理因子
• 2.2 化学因子
• 3 展望
• 第三节 水产环保饲料添加剂的研究进展
• 1 维生素
• 2 有效微生物群
• 2.1 EM 在种植业中的应用
• 2.2 EM 在畜牧养殖业中的应用
• 2.3 EM 在水产养殖业中的应用
• 3 低聚糖
• 4 螺旋藻
• 第四节 杂交育种在海洋无脊椎动物中的研究与应用
• 1 传统杂交育种在海洋无脊椎动物育种中的应用
• 2 分子标记技术在海洋无脊椎动物杂交育种的应用
• 2.1 分子标记的发展
• 2.2 分子标记在杂交育种中的应用
• 第二章 中国青刺参苗种培育技术的研究
• 第一节 温度和盐度对刺参幼虫生长及存活的影响
• 0 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据统计
• 2 结果
• 2.1 温度对幼虫生长和存活的影响
• 2.2 盐度对幼虫生长和存活的影响
• 3 讨论
• 3.1 温度对幼虫生长和存活的影响
• 3.2 盐度对幼虫生长和存活的影响
• 第二节 不同附着基对幼虫附着变态的影响
• 0 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据统计
• 2 结果
• 2.1 不同附着基类型对幼虫附着变态的影响
• 2.2 微生物粘膜对幼虫附着变态的影响
• 2.3 组织提取液对幼虫附着变态的影响
• 3 讨论
• 3.1 不同附着基类型对幼虫附着变态的影响
• 3.2 不同微生物粘膜对幼虫附着变态的影响
• 3.3 组织提取液对幼虫附着变态的影响
• 第三节 几种环境因子对刺参幼虫附着变态的影响
• 0 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据统计
• 2 结果
• 2.1 温度对幼虫附着变态的影响
• 2.2 盐度对幼虫附着变态的影响
• 2.3 光照对幼虫附着变态的影响
• 3 讨论
• 3.1 温度对幼虫附着变态的影响
• 3.2 盐度对幼虫附着变态的影响
• 3.3 光照对幼虫附着变态的影响
• 第四节 不同营养添加剂对刺参生长的影响
• 0 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 饲养管理
• 1.3 样品测定与数据处理
• 2 结果
• 3 讨论
• 第三章 日本红刺参苗种培育技术的研究
• 第一节 密度、温度和盐度对红刺参幼虫生长及存活的影响
• 0 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据统计
• 2 结果
• 2.1 密度对幼虫生长和存活的影响
• 2.2 温度对幼虫生长和存活的影响
• 2.3 盐度对幼虫生长和存活的影响
• 3 讨论
• 3.1 密度对幼虫生长和存活的影响
• 3.2 温度对幼虫生长和存活的影响
• 3.3 盐度对幼虫生长和存活的影响
• 第二节 不同温度、盐度条件下红刺参盐度耐受性的研究
• 0 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 稚参来源
• 1.2 方法
• 1.3 数据处理
• 2 结果
• 3 讨论
• 第四章 刺参杂交子一代的微卫星和 AFLP 分析
• 0 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 基因组DNA 的提取
• 1.3 微卫星标记分析
• 1.4 AFLP 标记分析
• 2 结果
• 2.1 微卫星标记分析
• 2.2 AFLP 标记分析
• 3 讨论
• 3.1 微卫星标记对刺参杂交子代的遗传分析
• 3.2 AFLP 标记对刺参杂交子代的遗传分析
• 参考文献
• 学术成果
• 致谢