体外研究贺斯、佳乐施、万汶对成人静脉血辅助性T淋巴细胞分化的影响

体外研究贺斯、佳乐施、万汶对成人静脉血辅助性T淋巴细胞分化的影响

论文摘要

研究背景机体免疫系统的变化越来越引起人们的关注,其对疾病的预后和转归有重要的影响。组织损伤,严重的应激反应,输血均可抑制机体的免疫系统,延缓患者康复,导致围术期感染、肿瘤复发和转移。有研究表明,输血引起的免疫抑制在其中的作用最为重要。为预防交叉感染,缓解输血引起的免疫抑制,因此血浆代用品成为容量治疗的重要手段。它可以补充血浆容量,维持血流动力学稳定;改善微循环和组织灌注,增加组织氧供;减少并避免血液制品输入并发症。虽然血浆代用品对机体扩容,肝肾功能,凝血方面的作用已有许多研究报告,但其对免疫系统的影响有待进一步研究。贺斯、佳乐施、万汶是常用的胶体液,贺斯和万汶为羟乙基淀粉制剂,佳乐施为明胶制剂。目的观察比较贺斯、佳乐施、万汶对成人静脉血辅助性T淋巴细胞(Th细胞)分化的影响。方法采集18例健康志愿者外周静脉血20ml,采用随机区组设计,每份血样均参与下列各组研究。根据临床常用剂量设置20%,40%(体积比)两个血液稀释浓度,分为空白对照组(C组)、不同剂量贺斯组[20%(H1组)、40%(H2组)]、不同剂量佳乐施组[20%(G1组)、40%(G2组)]、不同剂量万汶组[20%(V1组)、40%(V2组)]。用两种不同方法评估Th细胞的功能分化情况:(1)胞内细胞因子检测:将全血在体外用相应剂量的药物预先培养24h,然后加入刺激剂(氟波醇乙酯、离子霉素及蛋白质转运抑制剂),刺激4h,采用流式细胞技术测定每份样本中Th1及Th2细胞亚群比例,并计算Th1细胞与Th2细胞的比值(Th1/Th2)。(2)分离外周血单个核细胞(PBMcs),经药物预处理24小时后,加入刺激剂植物血球凝集素继续培养48小时,采用流式蛋白检测技术(CBA)检测培养上清中Th1(IFN-γ、TNF-α、IL-2)及Th2(IL-4、IL-6、IL-10)型细胞因子的浓度。统计分析采用SPSS11.5软件,组间比较采用随机区组设计方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果胞内细胞因子检测法:与C组比较,Th1亚群比例在H1组、V1组升高(P<0.05),G2组降低(P<0.01);Th2亚群比例在H2组、G2组、V2组均降低(P<0.05);Th1/Th2比值在H2组、G2组、V1组、V2组均升高(P<0.05)。细胞培养上清细胞因子浓度测定:贺斯和万汶组六种细胞因子除了IL-10(P<0.01)外均上升;佳乐施组IL-4,IL-6升高(P<0.01),余不变。结论在20%浓度时,贺斯、万汶可促使Th细胞向Th1细胞分化,佳乐施作用不明显;在40%浓度时,贺斯、万汶抑制Th2细胞的分化,佳乐施对Th1和Th2细胞的分化均呈抑制作用。万汶在两种浓度下均可促使Th1/Th2比值升高。

论文目录

  • 缩略词表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 引言
  • 材料与方法
  • 结果
  • 分析与讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 致谢
  • 综述
  • 流式细胞术检测胞内细胞因子的表达及意义
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