烟草黑胫病生防菌剂的研制

论文摘要

烟草黑胫病是生产上的毁灭性病害,目前黑胫病的预防和控制严重依赖化学农药,主用药剂品种单一且使用年限长,防效降低、农药残留以及环境污染等问题越来越严重。本文通过开展高效生防菌株的筛选、发酵工艺与菌剂研制等关键技术研究,寻求利用生物防治途径控制烟草黑胫病的技术和方法,主要研究结果如下1.从烟草根际和根围土壤中分离到107个细菌分离物,通过室内平板对峙培养筛选,筛选到13株对烟草黑胫病菌有拮抗作用的菌株,LZ-7菌株的室内平板抑菌效果最好,抑菌带宽度达9.62mm。经黑胫病防治盆栽实验,LZ-7控病作用较好,防治效果达100%,对烟草表现出了良好的促生作用,LZ-7菌株处理烟苗,生长健壮,叶色浓绿,叶片、株高均较对照增加。2.利用分子生物学技术对LZ-7菌株分类地位进行了初步鉴定,结果表明LZ-7与Bacillus pumilus的同源性为99%,证明该菌属于短小芽孢杆菌。3.通过单因素及止交试验对短小芽孢杆菌LZ-7的产芽孢条件进行了优化,最终确定了摇瓶最佳培养条件：2%玉米粉2%、5%豆饼粉、0.05%MgSO4·7H2O和1%MnSO4·H2O,初始pH值7.0,培养时间为60h,装液量为100mL/250mL,最终芽孢形成率达97.54%。4.筛选LZ-7活体菌剂的理想填料,以延长制剂的货架期,提高其大田防病效果。结果表明,供试的硅藻土、高岭土和白炭黑三种载体中,白炭黑对LZ-7菌液吸附性能最好,吸附能力可以达3.25L/kg,以白炭黑为吸附载体的菌剂存放6个月LZ-7存活率为60%以上,且田间防治烟草黑胫病效果较好,200-500倍液防效可达55%以上,与对照药剂甲霜灵锰锌防治效果相当。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 课题提出的背景及研究意义
• 1.1.1 烟草黑胫病危害巨大
• 1.1.2 烟草黑胫病严重依赖化学防治
• 1.1.3 课题的研究意义
• 1.2 国内外研究现状
• 1.2.1 病原学
• 1.2.2 病害流行学
• 1.2.3 烟草黑胫病防治
• 1.2.4 黑胫病生物防治
• 1.2.5 芽孢杆菌用于烟草病害生物防治研究
• 1.3 研究前景及展望
• 1.4 本课题主要研究内容与研究思路
• 1.4.1 主要研究内容
• 1.4.2 研究思路
• 第二章 烟草黑胫病生防细菌菌株筛选与鉴定
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 供试材料
• 2.1.2 烟草黑胫病菌拮抗菌的分离和筛选
• 2.1.3 温室盆栽防病试验
• 2.1.4 温室促生效果测定
• 2.1.5 菌株的分子生物学鉴定
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 烟草黑胫病菌拮抗细菌的筛选
• 2.2.2 生防菌株对烟草黑胫病菌的温室防效测定
• 2.2.3 拮抗细菌LZ-7菌株16S rDNA鉴定
• 2.3 分析与讨论
• 第三章 LZ-7菌株发酵条件优化与小试
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 供试材料
• 3.1.2 LZ-7菌株种子培养
• 3.1.3 培养基组成优化
• 3.1.4 培养条件的优化
• 3.1.5 测定方法
• 3.1.6 发酵罐小试
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 碳源的单因素试验
• 3.2.2 氮源的单因素试验
• 3.2.3 金属离子单因素试验
• 3.2.4 培养基组成正交试验
• 3.2.5 培养条件的优化
• 3.3 发酵罐小试
• 3.3.1 发酵过程
• 3.3.2 LZ-7菌株在7.5L发酵罐中的生长情况
• 3.4 分析与讨论
• 第四章 LZ-7菌剂研制与田间防效试验
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 细菌发酵液的制备培养方法
• 4.1.3 载体吸附能力的测定
• 4.1.4 菌剂的初步研制
• 4.1.5 菌剂拮抗活性与防效测定
• 4.1.6 白炭黑载体LZ-7菌剂田间防治烟草黑胫病效果试验
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 不同载体对LZ-7菌体生长的影响
• 4.2.2 载体吸附能力的测定
• 4.2.3 菌剂拮抗活性和货架期
• 4.2.4 不同载体对烟草黑胫病的防治效果
• 4.2.5 LZ-7菌剂防治烟草黑胫病田间试验
• 4.3 分析与讨论
• 第五章 全文结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历