花椒麻味物质标准品的制备技术及其替代品的筛选与应用

论文摘要

花椒为芸香科（Rrutaceae）花椒属（Zanthoxylum L.）的一种香辛料植物,也是我国传统的“八大调味品”之一。花椒中以花椒素为代表的链状不饱和脂肪酸酰胺是花椒特有的强烈的辛麻味的主要成分。我国虽为花椒的生产和消费大国,但对花椒麻味物质的基础性研究不够。因花椒麻味物质标准品很难制备,且极易氧化不能暴露在空气中,还没有市售的花椒麻味物质标准品。本论文基于以上问题致力于花椒麻味物质标准品和替代品的技术研究,为花椒麻味物质的定量检测提供可行的方法。本文以江津产青花椒为原料,分离纯化花椒中的麻味物质,并寻找花椒麻味物质替代品,用替代品建立高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度计法定量检测花椒麻味物质的方法。主要研究结果如下：1.花椒麻味物质的分离纯化工艺为：花椒油树脂→逆流干柱层析→硅胶色谱柱层析→制备型高效液相色谱纯化→薄层层析,气相色谱法检测纯度→花椒麻味物质标准品2.逆流干柱层析法将花椒油树脂分成8部分,呈现在硅胶柱上有8个色带,由下至上各色带的颜色分别为褐色、绿黄色、白色、淡绿色、淡黄色、灰绿色、墨绿色、橙黄色。测定8个色带的甲醇浸提液在254nm处的吸光值并结合感官评定,其中麻味物质主要集中在第2,3部分。3.应用薄层色谱检测花椒麻味物质结晶体D2的纯度,发现最终纯化完的结晶在薄层层析检测中只有一个色点Rf=0.32,只经过逆流干柱层析的花椒麻味物质粗品D有三个色点Rf=0.32,0.75,0.78,花椒油树脂的稀释液有五个明显的色点Rf=0.32,0.6,0.75,0.78,0.79。4.筛选与花椒麻味物质结构类似的不饱和长链脂肪酸酰胺,且在254nm下有最大吸光值的麻味物质替代品,确定A物质,B物质,C物质为花椒麻味物质替代品。5.分别以A物质,C物质为标样,建立花椒麻味物质含量的高效液相色谱（HPLC）检测方法。计算替代品A物质的换算系数f=0.14,替代品C物质的换算系数f=0.426。检测条件为：70%甲醇—水等浓度洗脱,分析型HC-C18柱。用花椒麻味物质标准品及两个替代品分别计算4个样品的花椒麻素含量,结果的RSD值均小于5%。该方法稳定性好,准确度高,灵敏度高。6.分别以A物质,C物质为标样,建立花椒麻味物质含量的气相色谱仪（GC）检测方法。计算替代品A物质的换算系数f=1.46,替代品C物质的换算系数f=2.43。检测条件为：柱温150℃--250℃,升温速率为5℃／min,DB-1型柱。用花椒麻素标准品及两个替代品分别计算4个样品的花椒麻味物质含量,结果的RSD值均小于5%。该方法稳定性好,准确度高,灵敏度高。7.分别以B物质,C物质为标样,建立花椒麻味物质含量的紫外分光光度法检测方法。计算替代品B物质的换算系数f=0.09,替代品C物质的换算系数f=0.25。检测条件为：UV-2450型紫外可见分光光度计,石英比色皿。用花椒麻素标准品及两个替代品分别计算4个样品的花椒麻素含量,结果的RSD值均小于5%。该方法稳定性好,准确度高,灵敏度高。本论文为重庆市重点自然科学基金项目“花椒和生姜中功效成分的组成和功能性质及定量检测方法研究”（CSTC,2006BA1007）”的资助。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第1章 文献综述
• 1.1 花椒的化学成分
• 1.1.1 挥发油
• 1.1.2 生物碱
• 1.1.3 酰胺类物质
• 1.1.4 木脂素
• 1.1.5 香豆素
• 1.1.6 其他成分
• 1.2 花椒麻味物质的提取方法
• 1.2.1 水蒸汽蒸馏法
• 1.2.2 有机溶剂提取法
• 2萃取法'>1.2.3 超临界CO₂萃取法
• 1.3 花椒麻味物质的呈味机理
• 1.4 花椒麻味物质的生理活性
• 1.5 花椒麻味物质的检测方法
• 1.5.1 高效液相色谱（HPLC）法
• 1.5.2 紫外分光光度计法
• 1.5.3 气质联用检测法
• 1.5.4 近红外光谱分析法
• 1.6 花椒的深加工和产业化
• 1.7 论文研究的目的意义和主要内容
• 1.7.1 本研究的目的意义
• 1.7.2 本研究的主要内容
• 1.7.3 本文的研究思路
• 第2章 花椒麻味物质的分离纯化与组成分析
• 2.1 引言
• 2.2 材料与设备
• 2.2.1 主要材料
• 2.2.2 主要设备
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 花椒麻味物质分离纯化工艺
• 2.4 花椒麻味物质纯度鉴定及组分分析
• 2.4.1 薄层层析检测结晶体纯度
• 2.4.2 气相色谱法检测结晶体纯度
• 2.4.3 气质联用法分析花椒麻味物质的成分
• 2.5 结果与分析
• 2.5.1 逆流干柱层析法制备花椒麻味物质粗品
• 2.5.2 硅胶柱层析法制备花椒麻味物质粗结晶体
• 2.5.3 制备型高效液相色谱（pre-HPLC）纯化
• 2.5.4 薄层色谱检验花椒麻味物质的纯度
• 2.5.5 气相色谱检验花椒麻味物质的纯度
• 2.5.6 气质联用法分析花椒麻味物质的成分
• 2.6 本章小结
• 第3章 花椒麻味物质替代品的筛选及其定量检测方法的建立
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 主要试剂
• 3.2.2 主要设备
• 3.3 试验方法
• 3.3.1 花椒麻味物质替代品的筛选
• 3.3.2 花椒麻味物质替代品与标准品换算系数的计算
• 3.3.3 用替代品定量检测花椒麻味物质—高效液相色谱（HPLC）法
• 3.3.4 用替代品定量检测花椒麻味物质—色相色谱（GC）法
• 3.3.5 用替代品定量检测花椒麻味物质—紫外分光光度计（UV）法
• 3.3.6 检测方法技术指标的测定
• 3.4 结果与分析
• 3.4.1 花椒麻味物质替代品的筛选
• 3.4.2 用替代品定量检测花椒麻味物质方法的建立—高效液相色谱（HPLC）法
• 3.4.3 用替代品定量检测花椒麻味物质方法的建立—色相色谱（GC）法
• 3.4.4 用替代品定量检测花椒麻味物质—紫外分光光度计法
• 3.5 本章小结
• 第4章 结论与展望
• 4.1 结论
• 4.2 展望
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间发表论文