-----乙醛、乙醇、丙酮、异丁醛、乙酸乙酯
刘学良史巍
哈药集团制药总厂哈尔滨150086
摘要顶空气相色谱法因其灵敏度高、重现性好、定量准确,对进样口污染小,在分析中更具有优势,采用顶空自动进样器还可以实现自动化。
关键词顶空气相色谱法标准加入法舒巴坦钠残留溶剂乙醛乙醇丙酮异丁醛乙酸乙酯
舒巴坦钠在生产过程中使用有机溶剂。残留溶剂是药品中对人体有害的杂质,需要控制其含量。2010版药典中将残留溶剂作为常规检查的项目。为了控制其含量通常采用气相色谱法分析。而顶空气相色谱法因其灵敏度高、重现性好、定量准确,对进样口污染小,在分析中更具有优势,采用顶空自动进样器还可以实现自动化。作者建立顶空气相色谱标准加入法检测上述残留溶剂,对于控制药品的质量起到了至关重要的作用。
实验部分
1.实验仪器及条件
1.1仪器及试剂:Agilent7890气相色谱仪,氢火焰离子化检测器(FID),GH—500B型氢气发生器(北京中兴汇利科技发展有限公司),GA500A型低噪音空气泵(北京中兴汇利科技发展有限公司),G1888A型顶空自动进样器。
乙醛(进口)含量100%
乙醇(色谱纯)上海化学试剂研究所
丙酮(色谱纯)上海化学试剂研究所
异丁醛(进口)上海化学试剂研究所
乙酸乙酯(色谱纯)上海化学试剂研究所
色谱柱:DB-1(30m×0.53mm×5μm)毛细管柱
1.2气相色谱条件:
柱温度40℃,维持6分钟,再以30℃/min升到80℃,维持8分钟;柱流速:3.0ml/min;检测器(FID)温度为250℃;进样口温度为200℃;顶空平衡温度为80℃,平衡时间为40min。
2.样品的测定
2.1取本品约1g,置10ml量瓶中,加冷却至10℃水溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品贮备液。精密量取1ml,置顶空瓶中,精密加冷却至10℃的水1ml,摇匀,密封,作为供试品溶液;另精密称取乙醛8.0mg、乙醇、丙酮、异丁醛、乙酸乙酯各约20mg,置装有10ml冷却至10℃水的100ml量瓶中,用冷却至10℃水稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;精密量取对照品贮备液1ml,置顶空瓶中,精密加供试品贮备液1ml,摇匀,密封,作为对照品溶液。取供试品溶液与对照品溶液顶空进样,记录色谱图(如下图),按标准加入法以峰面积计算,乙醛、乙醇、丙酮、异丙醇、异丁醛、乙酸乙酯的含量。
图1对照品色谱图
其中1.957min为乙醛,2.265min为乙醇,2.478min为丙酮,3.229min为异丁醛,6.517min为乙酸乙酯
图2供试品色谱图
其中1.958min为乙醛,2.268min为乙醇,2.479min为丙酮,3.229min为异丁醛,6.507min为乙酸乙酯
3.结果与讨论
3.1试验条件的选择
3.1.1溶剂及其温度的影响
乙醛和异丁醛挥发性强,在对照品和样品的制备过程中容易挥发损失,影响测量结果的准确性。作者对溶剂水的温度进行了试验,如下表,控制水的温度在10℃时,乙醛和异丁醛的回收率最好。
水温℃乙醛回收率%异丁醛回收率%
1096.798.7
1595.296.3
2085.694.6
2580.390.2
3.1.2顶空条件选择
作者对顶空平衡温度和平衡时间作了试验,平衡温度在80℃、平衡时间40分钟效果较好。当平衡时间短时,气液两相达不到平衡。当平衡时间大于60分钟时,由于顶空瓶的气密性变差,色谱峰的峰面积会降低。
3.1线形范围的测定:精密称取乙醛80mg、乙醇、丙酮、异丁醛、乙酸乙酯各约200mg置100ml量瓶中,用冷却至10℃水稀释至刻度,摇匀,再分别取2.0ml,4.0ml,6.0ml,8.0ml,10.0ml,12.0ml,14ml于100ml容量瓶中,用冷却至10℃水稀释至刻度,作为对照品贮备液,再分别量取各个浓度的对照品贮备液1ml置顶空瓶中,加水1ml,密封,按照上述色谱条件测定,以各组分的峰面积对浓度作线性回归。乙醛回归方程:Y=2250.3x+0.05;乙醇回归方程Y=301.6x+2.011;丙酮回归方程:Y=305.6x+6.201;异丁醛回归方程:Y=602.8x-7.32;乙酸乙酯回归方程:Y=5013.3x+10.25。
3.2精密度及回收率试验:在已知残留溶剂浓度的样品中,分别加入高、中、低浓度的乙醛、乙醇、丙酮、异丁醛、乙酸乙酯进行6次重复测定,乙醛回收率在94.7%和96.7%之间,RSD:0.67%-2.2%;乙醇回收率在98.0%和103.2%之间,RSD:0.28%-3.2;丙酮回收率在96.4%和102.0%之间,RSD:1.2%-2.6%;异丁醛回收率在96.0%和98.7%之间,RSD:1.5%-3.1%;乙酸乙酯回收率在100.4%和103.8%之间,RSD:2.3%-3.4%
4.结论
经实验表明乙醛、乙醇、丙酮、异丁醛及乙酸乙酯五种组分在非极性毛细管柱DB-1上分离良好。采用顶空进样精密度高,对进样口污染小且便于实现自动化。本方法采用标准加入法克服了基体效应的影响,重现性好,定量准确可靠,非常符合药品中残留溶剂的测定。
参考文献
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[2]《中国华人民共和国药典》.2010版二部
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色谱.2004年,第22卷,第4期,第442页。
[4]范毅颖,何莉莉.顶空气相色谱法测定头孢噻肟钠中残留溶剂含量.
黑龙江医药2006第19卷,第4期。