神经生长因子对大鼠脑缺血再灌注后caspase-3及AngⅡ表达的影响

论文摘要

目的:采用SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察再灌注不同时间点大鼠神经功能缺损程度及胱天蛋白酶-3（caspase-3）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的表达,并探讨神经生长因子（NGF）对大鼠脑缺血再灌注的保护作用,为临床应用神经生长因子防治缺血性脑血管病提供理论依据。方法:健康成年SD大鼠45只（由大连医科大学实验动物中心提供）,雌雄不限,体重200～250g,清洁级,饲养环境温度21℃,自由进食水。随机分为假手术组（n=5）（第1组）;对照组（n=30）,按缺血2h再灌注2h、6h、12h、24h、48h、72h再分为6组（n=5）（分别为第2、3、4、5、6、7组）;其中缺血2h再灌注24h组又分两个亚组,分别为神经生长因子组（n=5）（第8组）和生理盐水对照组（n=5）（第9组）。用10%的水合氯醛（0.35ml/100g腹腔注射）麻醉动物,取仰卧位固定在手术台上,行右侧大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型（MCAO）手术,颈部正中切口,分离出右侧颈总、颈外和颈内动脉,结扎颈外动脉分支起始处、颈总动脉近心端,在颈总动脉分叉切口处剪一小口,把头端蘸有石蜡的直径为0.20mm的高弹力鱼线向颈内动脉端插入,继续向前推进直到感觉有轻微阻力,即约18mm,提示已到大脑中动脉的起始部。2h后缓慢拔出鱼线即可实施再灌注。动物苏醒后观察其体态及行为,以判断MCAO模型是否成功。假手术组插入尼龙线后马上抽出,余步骤同手术组。缺血再灌注模型动物清醒后,右侧前肢屈曲内收者为研究对象。第8组大鼠于再灌注后5min肌肉注射NGF（每100g体重NGF500BU/0.1ml）,第9组以同样方法注入相同体积的无菌生理盐水。分别观察几组动物的以下指标:Zea5分制标准评分进行各组大鼠神经功能评价;经过免疫组化和HE染色检测大鼠脑内caspase-3及AngⅡ表达。结果:1、神经功能评分:2～9组分别为1.9050±0.3544,2.2575±0.1379,2.4250±0.1457,2.6075±0.1522,2.8155±0.1653,3.1613±0.2210,1.9588±0.2976,2.5663±0.2220,其中NGF组（8组）与相应的生理盐水（9组）对照组比较,神经功能障碍明显减轻。（P＜0.01）2、大鼠脑缺血再灌注后,脑内caspase-3阳性细胞表达自6h开始明显上升,24h达峰,然后逐渐下降;AngⅡ在缺血再灌注6h于梗死灶内的一些单个细胞中发现,在12～24h后表达明显增多,48h达高峰,持续至72h。（P＜0.05或P＜0.01）与生理盐水组相比,缺血早期给予NGF干预（NGF组）,可使脑内caspase-3及AngⅡ的表达降低。（P＜0.05或P＜0.01）结论:肌肉注射NGF对大鼠脑缺血再灌注有明显的保护作用,NGF组caspase-3及AngⅡ的表达较生理盐水对照组降低可能是其机制之一。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢