西宁辣椒内生芽孢杆菌生物学特性及促生效应的研究

论文摘要

辣椒是青海省农业的重要经济作物之一。对青海辣椒内生细菌（endophyticbacteria from capsicum）促生效应的研究,能发挥天然微生物无毒、无污染的优势。本文从青海西宁市苗圃、大通、民和等地区农家种植的辣椒中分离内生芽孢杆菌,共分离了6株菌株,通过回接试验筛选到2株性状比较优良的目标菌株,经鉴定菌株X1为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,菌株W1为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）,并对辣椒内生芽孢杆菌的生物学特性及促生效应进行了初步研究。以抗利福平（100μg/ml）为标记,对枯草芽孢杆菌X1菌株在辣椒体内的定殖动态进行测定,结果表明,通过浸种、灌根和涂抹叶片方法接种,该菌株均能在辣椒体内定殖,其中以涂抹叶片接种进入植物体内的菌量最多。用浓度为5×106cfu/ml的菌液浸泡辣椒种子24h,出苗后可从辣椒体内分离到大量目标细菌。促生效果试验表明,无论浸种、涂抹叶片或浇灌土壤接种均对辣椒生长表现出明显的促生作用,其中以涂抹叶片法接种效果最好。X1菌株能够进入植物体内传导,该菌在植物体内定殖量的多少与其促生作用呈正相关;菌株作用能提高植物的根系活力。菌株X1发酵培养基优化试验表明,最佳培养基配比是:葡萄糖12.0g,硫酸铵[（NH4）2SO4]2.0g,氯化钠（NaCl）4.0g,磷酸二氢钾（KH2PO4）3.0g。最佳发酵条件:接种量2.0%,温度25℃,pH值7.0,发酵时间42h。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1.1 植物内生细菌的分离
• 1.2 植物内生细菌的种类
• 1.3 植物内生细菌定殖的进展研究
• 1.3.1 定殖标记与动态分布
• 1.3.2 内生细菌进入植物体的途径
• 1.3.3 影响内生细菌定殖的因素
• 1.4 植物内生细菌促生作用的研究
• 1.4.1 植物内生细菌促生长作用机理的研究
• 1.5 植物内生细菌抑制病原菌作用的研究
• 1.5.1 植物内生细菌抑制作用机理的研究
• 1.6 潜在的致病性
• 1.7 植物内生芽孢杆菌研究进展
• 1.8 植物内生细菌应用前景展望
• 1.8.1 环境治理植物内生细菌
• 1.8.2 抗病虫害基因工程菌
• 1.8.3 微生物肥料
• 1.8.4 医学方面的应用
• 1.8.5 微生物抗菌蛋白
• 第二章 辣椒内生芽孢杆菌的分离与鉴定
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 主要试验仪器
• 2.1.2 主要试验药品
• 2.1.3 供试辣椒品种
• 2.1.4 培养基
• 2.1.5 无土栽培基质及营养液
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 内生芽孢杆菌的分离纯化
• 2.2.2 菌落形态
• 2.2.3 生芽孢试验
• 2.2.4 回接试验
• 2.2.5 生物学特性的研究
• 2.2.5.1 形态学观察
• 2.2.5.2 芽孢杆菌生理生化特性的研究
• 2.2.6 芽孢杆菌生长曲线的绘制
• 2.3 试验结果与分析
• 2.3.1 不同品种辣椒内生芽孢杆菌的数量
• 2.3.2 分离菌株对辣椒的促生效果
• 2.3.3 生理生化试验结果
• 2.3.4 试验菌株生长曲线的绘制
• 第三章 内生芽孢杆菌定殖动态的研究
• 3.1 试验方法
• 3.1.1 抗利福平（Rif）突变菌株的筛选
• 3.1.2 不同接种方法测定筛选菌株在辣椒中的内生定殖动态
• 3.1.3 定殖菌的回收与鉴定
• 3.2 试验结果与分析
• 3.2.1 不同接种方法抗Rif标记菌株在辣椒体内定殖动态
• 3.2.2 定殖菌的回收与鉴定
• 第四章 发酵条件的研究
• 4.1 试验材料
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 碳源利用试验
• 4.2.2 氮源利用试验
• 4.2.3 初始pH试验
• 4.2.4 液体发酵接种量试验
• 4.2.5 培养基最佳组合正交试验
• 4.2.6 培养条件最佳组合正交试验
• 4.3 试验结果与分析
• 4.3.1 单因子碳源试验结果
• 4.3.2 单因子氮源试验结果
• 4.3.3 初始pH值试验结果
• 4.3.4 接种量试验结果
• 4.3.5 培养基正交试验
• 4.3.6 培养条件正交试验
• 第五章 X1和W1菌株对辣椒的促生作用
• 5.1 促生试验方法
• 5.1.1 不同菌液浓度浸种对辣椒的促生作用
• 5.1.2 浸种法接种
• 5.1.3 浇灌土壤法接种
• 5.1.4 涂抹叶片法接种
• 5.2 菌液浓度对辣椒根系活力的影响试验
• 5.2.1 试验材料
• 5.2.2 试验方法
• 5.3 试验结果与分析
• 5.3.1 浸种法接种结果
• 5.3.2 浇灌土壤法接种结果
• 5.3.3 涂抹叶片法接种结果
• 5.3.4 菌液浓度对辣椒根系活力的影响试验结果
• 第六章 结果讨论与展望
• 6.1 结果讨论
• 6.1.1 内生芽孢杆菌优良菌株的筛选
• 6.1.2 内生芽孢杆菌优良菌株的定殖规律
• 6.1.3 内生芽孢杆菌生物学特性的研究
• 6.1.4 内生芽孢杆菌发酵条件的研究
• 6.1.5 内生芽孢杆菌促生效应的研究
• 6.2 展望
• 参考文献
• 图版
• 致谢
• 个人简历
• 在学期间发表的学术论文