狭叶五味子中化合物phyllocoumarin和（-）-epicatechin体外抗HBV活性的初步研究

论文摘要

【目的】联合用药比单一用药更能降低HBV感染者的发病率和死亡率,但长期联合用药导致耐药、副作用限制了抗HBV药物的使用。因此,不断地开发新的抗HBV药物迫在眉睫。目前临床抗HBV药物均为核苷类药物,如拉米夫定、阿德福韦酯、更昔洛韦、法昔洛韦、恩替卡韦和恩曲他滨,等。从天然资源中寻找新的抗HBV药物或先导化合物的研究是国内外新药研制中非常活跃的领域之一,也是我国近期创制新药的一条捷径。在过去20多年里,从天然资源中分离和鉴定出许多抗HBV药物。我国科学家发现北五味子（Schisandra chinensis）粗提物及其多种有效成分作用于多靶点,具有保肝解毒、抗氧化和抗HBV病毒等多方面的作用,并研发成功联苯双脂和双环醇两种具有我国自主知识产权的治疗肝炎药物。通过对狭叶五味子（Schisandra lancifolia）茎叶的化学成分和抗病毒活性研究,我们发现了Lancifodilactone F和Lancifodilactone G等多个具有抗HIV-1活性的化合物。本文对来源于狭叶五味子的化合物phyllocoumarin和（-）-epicatechin对抗HBV活性进行初步研究。【方法】筛选研究从狭叶五味子（Schisandra lancifolia）中分离化合物phyllocoumarin （1）和（-）-epicatechin（2）的体外抗HBV活性,以HepG2.2.15细胞为体外研究HBV模型,分别用RPMI-1640完全培养基稀释不同浓度的化合物1和2,与HepG2.2.15细胞共培养3天后收集上清,采用MTT法检测药物对HepG2.2.15细胞的生长影响和ELISA法检测培养上清中HBV HBsAg和HBeAg的含量,评价化合物1和2对HBV复制的影响。【结果】化合物1和2具有一定的体外抗HBV活性,其细胞毒性低,CC50均大于200μg/ml。化合物1具有较强的抑制HBsAg和HBeAg分泌作用。阳性对照药物阿德福韦酯也抑制HBV HBsAg和HBeAg分泌,但在相同浓度（1.6μg/ml）下其抑制作用较化合物1弱。【结论】phyllocoumarin和（-）-epicatechin能抗HBV活性,且毒性小。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 引言
• 第2章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 植物及化合物phyllocoumarin 和（-）-epicatechin 的分离纯化
• 2.1.2 试剂
• 2.1.3 试剂盒
• 2.1.4 主要仪器
• 2.1.5 细胞培养
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 细胞毒性实验
• 2.2.2 ELISA 法检测HBsAg 和 HBeAg 含量
• 2.3 统计学处理
• 第3章 结果
• 3.1 化合物phyllocoumarin 和（-）-epicatechin 对 HepG2.2.15 细胞的毒性作用
• 3.2 化合物phyllocoumarin 和（-）-epicatechin 对 HepG2.2.15 细胞分泌HBsAg 和 HBeAg 的抑制作用
• 第4章 讨论
• 4.1 MTT 法和ELISA 法分别检测化合物phyllocoumarin 和（-）-epicatechin 对HepG 2.2.15 细胞的毒性及上清HBsAg 和 HBeAg 分泌含量变化
• 4.2 天然药物和中草药抗 HBV 活性
• 第5章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果