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益生菌雏鸡ND免疫后免疫器官免疫功能及IL-2 mRNA表达变化

2020-12-10阅读(1020)

益生菌雏鸡ND免疫后免疫器官免疫功能及IL-2 mRNA表达变化

论文摘要

本试验以1日龄雏鸡为研究对象,应用细胞培养技术、MTT检测法,组织化学染色法和荧光定量PCR技术全面系统的研究了雏鸡应用益生菌及其联合ND疫苗免疫和ND强毒攻击后,免疫器官（胸腺、脾脏、法氏囊）T、B淋巴细胞增殖功能及其数量和IL-2 mRNA表达的动态变化。旨在全面系统揭示益生菌及其联合ND疫苗对雏鸡免疫器官细胞和体液免疫功能的影响,为益生菌研发利用提供重要的科学实验依据。研究结果发现:1.1日龄雏鸡应用益生菌后,其免疫器官TANAE+细胞数量均较对照雏鸡不同程度增多,于7～14天差异明显（P<0.05或P<0.01）;胸腺和脾脏T淋巴细胞增殖功能明显高于未饲喂益生菌的对照雏鸡,于4～7天差异显著（P<0.05或P<0.01）;法氏囊和脾脏B淋巴细胞增殖功能分别于4～14天和4～7天明显高于未饲喂益生菌的对照雏鸡（P<0.05或P<0.01）。表明明雏鸡应用益生菌后,其免疫器官细胞和体液免疫功能均明显增强。2.雏鸡ND疫苗免疫后,试验雏鸡免疫器官T、B淋巴细胞增殖功能和TANAE+细胞数量均明显高于对照雏鸡,其中,益生菌联合ND疫苗雏鸡又较ND疫苗单独免疫雏鸡不同程度升高,表明益生菌与ND疫苗联合使用能提高机体免疫器官细胞和体液免疫水平,可见益生菌增强了免疫器官对ND疫苗的细胞和体液免疫应答,发挥了免疫增强效应。3.益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡后,其免疫器官IL-2 mRNA表达均明显高于对照雏鸡、ND疫苗单独免疫雏鸡,表明益生菌和ND疫苗均可刺激T细胞增殖、活化,促进IL-2 mRNA表达,使免疫器官分子免疫调节功能增强,其中益生菌联合ND疫苗免疫效果更明显,可见益生菌经促进细胞因子IL-2的分泌,进而发挥免疫调节作用。4.ND强毒攻击后,试验雏鸡免疫器官T、B淋巴细胞增殖功能、TANAE+细胞数量及IL-2 mRNA表达均明显高于对照雏鸡,其中,益生菌与ND疫苗联合使用效果明显,可见,益生菌不但能提高免疫器官细胞和体液免疫水平,还能增强免疫器官对ND疫苗的细胞和体液免疫应答,分泌大量细胞因子和特异性抗体,增强ND疫苗的免疫效果。5.ND强毒攻击后,对照雏鸡100%发病,呈现典型新城疫症状,全部死亡;而益生菌组、ND疫苗组、益生菌联合ND疫苗组雏鸡发病率分别为60%、20%、0%,并全部存活。表明益生菌和ND疫苗均可提高机体免疫力,增强机体对ND强毒攻击的抵抗力,两者联合使用效果明显好于单独疫苗免疫,可见益生菌有增强特异性疫苗免疫保护的作用。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 引言
  • 1.1 益生菌研究进展
  • 1.1.1 益生菌概念及研究现状
  • 1.1.2 益生菌的分类
  • 1.1.3 益生菌的作用机制
  • 1.1.4 益生菌与动物免疫
  • 1.2 新城疫研究进展
  • 1.2.1 病原变异趋势
  • 1.2.2 NDV 流行特点
  • 1.2.3 ND 的防治
  • 1.3 禽类免疫系统及其IL-2 研究进展
  • 1.3.1 禽类免疫系统的特点
  • 1.3.2 禽类T 淋巴细胞及其表面标志
  • 1.3.3 禽类B 淋巴细胞
  • 1.3.4 禽类IL-2 研究概况
  • 1.3.5 IL-2 的生物学特性
  • 1.3.6 IL-2R
  • 1.3.7 IL-2 的应用
  • 1.4 研究的目的和意义
  • 2 材料和方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.1.1 试验动物
  • 2.1.2 益生菌
  • 2.1.3 ND 疫苗和ND 强毒
  • 2.1.4 主要试剂
  • 2.1.5 主要仪器设备
  • 2.2 试验方法
  • 2.2.1 试验设计及动物处理
  • 2.2.2 被检材料采取
  • 2.2.3 检测指标及方法
  • 2.3 数据处理
  • 3 结果与分析
  • 3.1 鸡IL-2 mRNA 表达Real Time PCR 检测方法的建立及应用
  • 3.1.1 总RNA 提取
  • 3.1.2 鸡IL-2 mRNA 表达Real Time PCR 检测方法的建立
  • 3.2 益生菌雏鸡免疫器官免疫功能及IL-2 mRNA 表达变化
  • 3.2.1 益生菌雏鸡免疫器官IL-2 mRNA 表达变化
  • 3.2.2 益生菌雏鸡免疫器官免疫功能变化
  • 3.3 益生菌ND 免疫雏鸡免疫器官免疫功能及IL-2 mRNA 表达变化
  • 3.3.1 益生菌ND 免疫雏鸡免疫器官IL-2 mRNA 表达变化
  • 3.3.2 益生菌ND 免疫雏鸡免疫器官免疫功能变化
  • 3.4 雏鸡ND 强毒攻击后免疫器官免疫功能及IL-2 mRNA 表达的变化
  • 3.4.1 雏鸡ND 强毒攻击后免疫器官IL-2 mRNA 表达的变化
  • 3.4.2 雏鸡ND 强毒攻击后免疫器官免疫功能变化
  • 3.5 ND 强毒攻击后发病及保护情况
  • 4 讨论
  • 4.1 益生菌对雏鸡免疫器官免疫功能的影响及其机制
  • 4.1.1 益生菌对雏鸡免疫器官细胞免疫功能的影响及其机制
  • 4.1.2 益生菌对雏鸡免疫器官体液免疫功能的影响及其机制
  • 4.2 益生菌联合ND 疫苗对雏鸡免疫器官免疫功能的影响及其机制
  • 4.2.1 益生菌联合ND 疫苗对雏鸡免疫器官细胞免疫功能的影响及其机制
  • 4.2.2 益生菌联合ND 疫苗对雏鸡免疫器官体液免疫功能的影响及其机制
  • 4.3 益生菌及其联合ND 疫苗对雏鸡免疫器官IL-2 mRNA 表达的影响及其机制
  • 5 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录
  • 攻读硕士学位期间发表的学术论文

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