论文摘要
目的:心肌缺血/再灌注损伤（myocardial ischemia/ reperfusion injury, MIRI ）是急性冠脉事件治疗过程中的常见现象。多项研究表明心肌缺血/再灌注损伤与中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophil leukocytes, PMN）的激活与释放反应密切相关,而细胞因子则参与了PMN粘附、穿越和向损伤区迁移的全部过程。新的第三代β受体阻断剂——卡维地洛（carvedilol, CAR）,不仅能阻断α1和β受体,而且有独立于受体阻断作用之外的抗氧化、抗炎等作用。CAR在心力衰竭中的抗炎作用已经得到了多项研究证实,但短期应用能否抑制缺血/再灌注期炎性因子的释放,能否减轻缺血/再灌注过程中PMN介导的炎性反应,国内现有报到尚少。本课题通过观察不同条件下心肌缺血/再灌注兔不同时段血清肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-alpha TNF-α）和心肌组织中髓过氧化物酶（Myeloperoxidase MPO）、丙二醛（Malondialdehyde MDA）的动态变化,研究CAR在兔MIRI中的抗炎作用,探讨其减轻急性心肌损伤的可能机制,为CAR更广泛的临床应用提供理论依据。材料与方法:健康新西兰白兔48只,体重2.5～3.0 kg,雌雄不拘,随机分为四组:（1）缺血再灌注组（IR组,n=12,生理盐水5ml/d灌胃1w）:结扎左室支造成心肌缺血,然后按缺血40分钟、再灌40分钟、再灌120分钟三种处理方法进一步分成三个亚组,每个亚组包括成功的动物模型4只;（2）卡维地洛预处理组（CAR组,n=12,CAR 3mg/kg/d,灌胃1w）:手术操作和亚组分法同IR组;（3）缺血预处理组（IPC组,n=12,生理盐水5ml/d灌胃1w）:结扎左室支,缺血5分钟,再灌注5分钟,反复3次[1],然后按上述亚组要求行缺血40分钟和开放处理,最终得到缺血40分钟、再灌40分钟、再灌120分钟三个亚组;（4）假手术组（Sham组,n=12,生理盐水5ml/d灌胃1w）:只于左室支处穿线而不结扎,进一步按IR组和CAR组相应时间点分成三个亚组。成功的动物模型达实验终点后取材,分别测定血清中TNF-α和心肌组织中MDA、MPO的含量,行缺血区心肌组织HE染色,光镜下观察心肌细胞形态变化及PMN浸润情况。所有实验数据均用SPSS11.5软件包进行统计学处理,以P<0.05为有统计学差异, P<0.01为有显著统计学差异。结果:1心肌匀浆MDA含量在缺血/再灌注中的变化各实验组的MDA含量均随时间延长而递增。Sham组各时间段MDA含量的变化无统计学差异。IR组、CAR组与IPC组各时间段MDA的含量分别为:[（4.79±0.12）vs （9.01±0.51 ）vs（22.56±1.59）]nmol/mgprot; [（4.69±0.12）vs （6.41±0.54）vs （13.92±0.53）]nmol/mgprot; （[4.71±0.12）vs（6.96±0.45）vs （14.90±0.65）] nmol/mgprot,差异均有显著统计学意义（F值分别为370.29,491.98,541.60, p值均<0.01）。同一时间段的四组间比较:IR组的MDA含量均高于Sham组、Car组和IPC组,其中再灌注40分钟和再灌注120分钟时的差异有显著统计学意义（F值分别为59.07,257.80, p值均<0.01）。再灌注40分钟和再灌注120分钟时,CAR组和IPC组的MDA含量均高于Sham组,显著有统计学意义（p值均<0.01）,但IPC组和CAR组心肌组织中MDA含量的差异无统计学意义（p值分别为0.13, 0.25）。2心肌匀浆MPO含量在缺血/再灌注中的变化各实验组的MPO含量均随时间延长而递增。Sham组各时间段MPO含量的变化无统计学差异。IR组、CAR组与IPC组各时间段MPO的含量分别为:（[2.60±0.33）vs （5.15±0.85 ）vs（8.63±0.25）] mU/mgprot; [（2.54±0.19）vs （4.17±0.78）vs （6.66±0.19）]mU/mgprot; [（2.59±0.30）vs（3.80±0.23）vs （6.94±0.22）] mU/mgprot,差异均有显著统计学意义（F值分别为498.00,572.71,313.52, p值均<0.01）。同一时间段的四组比较:IR组的MPO含量均高于Sham组、CAR组和IPC组,其中再灌注40分钟和再灌注120分钟时的差异有显著统计学意义（F值分别为13.49, 540.19, p值均<0.01）。再灌注40分钟和再灌注120分钟时, CAR组和IPC组的MPO含量均高于Sham组,有显著统计学意义（p值均<0.01）,但IPC组和CAR组MPO含量的差异无统计学意义（p值分别为0.39, 0.10）。3血清TNF-α在缺血/再灌注中的变化各实验组的TNF-α含量均随时间延长而递增。Sham组各时间段TNF-α含量的变化无统计学差异。IR组、CAR组与IPC组各时间段TNF-α的含量分别为:[（12.47±0.99）vs （23.01±0.82 ）vs（45.18±1.09）] pg/ml; [（11.14±0.97）vs （15.34±1.15）vs （33.88±0.99）]pg/ml; [（11.64±0.64）vs（16.77±0.66）vs （35.30±0.95）] pg/ml,差异均有显著统计学意义（F值分别为1177.67,540.28,1063.94, p值均<0.01）。同一时间段的四组比较:IR组的TNF-α含量均高于Sham组、CAR组和IPC组,其中再灌注40分钟和再灌注120分钟时的差异有显著统计学意义（F值分别为101.83,795.40, p值均<0.01）。再灌注40分钟和再灌注120分钟时,CAR组和IPC组的TNF-α含量均高于Sham组,有显著统计学意义（p值均<0.01）,但IPC组和CAR组TNF-a含量的差异无统计学意义（p值分别为0.06, 0.07）。4各实验组的病理变化特点正常心肌组织:心肌纤维排列整齐,细胞边界完整,心肌横纹清晰。IR组中:缺血40分钟时,心肌组织局部出现少量PMN浸润,大血管中可见PMN附壁,心肌细胞水肿,未见明显坏死灶;再灌注120分钟时,心肌细胞变性、坏死,边界不清,心肌组织中可见大量PMN浸润,心肌间质出血。CAR组和IPC组,再灌注120分钟时,心肌组织中可见PMN浸润,累及心肌层和心外膜,大小血管内外均可见PMN聚集,心肌细胞水肿、变性,心肌横纹不清楚,但程度均较IR组减轻。结论:1本研究通过观察IR、CAR、IPC三组缺血/再灌注兔缺血40分钟、再灌注40分钟、再灌注120分钟时的组织病理学特点及MDA、MPO、TNF-α的含量变化,发现缺血再灌注后心肌的PMN浸润程度和心肌的氧化损伤程度随时间延长而递增,二者呈正相关。2 CAR组和IPC组中MDA、MPO、TNF-α水平在各时段均低于IR组,病理组织学显示PMN浸润程度亦较IR组减轻,而CAR组和IPC组的差别不显著,表明CAR预处理能抑制缺血/再灌注期TNF-α的释放,减少PMN浸润,减轻缺血/再灌注心肌的氧化损伤,具有确切的抗炎作用和心肌保护作用,这可能与CAR抑制NF-κB的激活和ICAM-1、TNF-α的基因表达,改善血管内皮功能,促进NO的合成等有关。3 CAR和IPC对缺血/再灌注心肌损伤的干预效果无明显差别,提示CAR对缺血/再灌注心肌损伤具有肯定的预保护作用,为CAR更广泛地应用于临床提供了理论依据。
论文目录
相关论文文献
标签：心肌缺血论文; 再灌注损伤论文; 卡维地洛论文; 缺血预适应论文; 丙二醛论文; 髓过氧化物酶论文; 肿瘤坏死因子论文;