肿瘤缺氧、血管生成与肺癌的关系的研究

论文摘要

研究背景原发性支气管肺癌（简称肺癌）是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,约占所有肿瘤的12.4%,且发病率一直呈上升趋势。近年来,尽管其诊疗水平有较大的提高,但5年生存率仅为8.9%。肺癌预后差,主要与其发生转移有关,虽然临床医生采取了以手术为主的多学科综合治疗,但大多数患者仍死于肺癌的局部复发或远处转移。因此有关肺癌的发病机理、预防、早期诊断、治疗及预后仍然是研究的重点和难点。恶性肿瘤的生长、浸润及转移受多种因素的影响,缺氧和肿瘤血管的生长是两个重要的因素。非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）患者存在缺氧,碳酸酐酶（carbonic anhydrases IX, CAIX）被认为是一种可靠的缺氧标记物。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是目前已知的唯一能特异作用于血管内皮细胞的血管生长因子,已有研究表明VEGF在肺癌等多种肿瘤组织中表达并调节其生物学行为。目前国内尚无有关肺癌患者CAIX表达的研究,也没有同时检测肺癌患者CAIX和VEGF表达的研究报道。渗出性胸腔积液的常见病因为结核性和癌性,临床上二者的鉴别极为重要,将决定治疗和预后,但有时难以鉴别。研究表明VEGF是胸腔积液形成的关键介质,VEGF在肺癌胸膜转移导致恶性胸腔积液生成中具有重要的作用,肺癌导致的恶性胸液中VEGF明显升高。endostatin是一种特异性内皮细胞增生抑制剂,具有很强的抑制血管生成的作用,是目前已知作用最强、最专一的血管形成抑制因子之一。目前国内外有关胸腔积液中endostatin的研究还很少,而且目前尚无同时检测胸腔积液中VEGF和endostatin的研究。同时检测胸腔积液中VEGF和endostatin水平可能有助于结核性胸腔积液和癌性胸腔积液的诊断与鉴别诊断。吸烟与肺癌的关系众所周知,研究表明,吸烟是肺癌的重要危险因素,每年大约有300万人由于吸烟而死于肺癌,但其机制仍不十分清楚。在吸烟者中如何早期发现肺癌是临床研究的热点。肺癌等肿瘤的生长和转移均依赖于肿瘤血管的生成。国内外研究发现肺癌患者血液中VEGF和endostatin水平升高,但未见研究吸烟者尤其是吸烟伴肺癌患者血液中VEGF和endostatin水平的报道。研究吸烟者血中VEGF和endostatin水平,有助于进一步探讨吸烟导致肺癌的分子机制,为肺癌的预防及早期诊断提供新的理论依据。本课题分为以下三部分,现分述如下:第一部分碳酸酐酶Ⅸ和血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达及意义目的:探讨碳酸酐酶IX （carbonic anhydrases IX,CAIX）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及与临床病理参数的关系。方法:应用免疫组化方法检测84例NSCLC和20例正常肺组织中CAIX和VEGF的表达。结果:（1） NSCLC组织中CAIX和VEGF阳性表达率分别为71.4%（60/84）和66.7%（56/84）,均显著高于正常肺组织（P<0.01）,20例正常肺组织中未见CAIX和VEGF表达;（2） CAIX的表达与病理组织类型、肿瘤的大小、临床分期及淋巴结转移相关,鳞癌患者的CAIX阳性率明显高于腺癌患者（P<0.05）。且随临床分期Ⅰ～Ⅳ期的顺序明显上升（P<0.05）,同时有淋巴结转移组CAIX阳性表达率明显高于无淋巴结转移组（P<0.01）,CAIX的表达与肿瘤的分化程度无明显关系（P>0.05）。（3） VEGF的表达与肿瘤的大小、淋巴结转移及临床分期相关,有淋巴结转移组VEGF阳性表达率显著高于无淋巴结转移组（P<0.01）,临床分期中Ⅰ-Ⅱ期VEGF阳性表达率明显低于Ⅲ-Ⅳ期（P<0.05）;VEGF的表达与肿瘤的分化程度及病理组织类型无明显关系（P>0.05）。（4） CA IX和VEGF的表达呈正相关（r=0.405, P<0.01）。结论:CAIX和VEGF高表达均与NSCLC的发生、发展和浸润转移有关,二者可能起协同作用。第二部分血管内皮生长因子和内皮抑素检测对结核性和癌性胸腔积液的诊断价值目的:检测胸腔积液中血管内皮生长因子（VEGF）和内皮抑素（endostatin）在癌性和结核性胸腔积液中的含量,探讨二者及其比值在结核性和癌性胸腔积液中的鉴别诊断价值。方法:采用酶联免疫吸附法、竞争性酶免疫法分别检测胸腔积液中VEGF、endostatin含量。结果:（1）、癌性胸腔积液VEGF、endostatin含量分别为（4.4±2.9）ng/ml和（3.9±2.5）ng/ml,明显高于结核性胸腔积液（P <0.01, P <0.05）;（2）、胸腔积液中VEGF和endostatin对癌性胸腔积液诊断的灵敏度分别是57.5%和50.0%,特异性分别是81.0%和90.5%;检测VEGF/endostatin比值可提高诊断的灵敏度和特异性至97.5%和90.5%。结论:胸腔积液中VEGF和endostatin的升高有助于癌性胸腔积液的诊断,检测胸腔积液中VEGF/endostatin比值可极大提高对癌性胸腔积液诊断的敏感性和特异性。第三部分吸烟者血清VEGF和endostatin水平的变化及其意义目的:探讨吸烟者血清血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）和内皮抑素（endostatin）水平的变化及其临床意义。方法:采用病例-对照设计方法对伴和不伴肺癌的164例吸烟者测定血清VEGF和endostatin水平,将20例不吸烟健康人作为正常对照组。结果:（1）、吸烟伴肺癌组（82例）血清VEGF水平明显高于吸烟无肺癌组（82例）及正常对照组（P均<0.01）。吸烟无肺癌组高于正常对照组（P<0.05）;（2）、吸烟伴肺癌组血清endostatin水平明显高于正常对照组（P<0.01）,但与吸烟无肺癌组比较,差异无统计学意义（P>0.05）,吸烟无肺癌组高于正常对照组（P<0.05）;（3）、吸烟伴肺癌组血清endostatin/VEGF比值明显低于吸烟无肺癌组和正常对照组（P均<0.01）,但吸烟无肺癌组与正常对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。（4）、吸烟伴肺癌组和吸烟无肺癌组VEGF与endostatin均呈显著正相关（P均<0.01）。结论:吸烟可能是导致endostatin/VEGF失衡的重要因素,而endostatin/VEGF失衡又导致肺癌发生。吸烟者应定期检测血清VEGF、endostatin水平及endostatin/VEGF比值,endostatin/VEGF比值可能是吸烟者早期诊断肺癌的指标之一。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文 肿瘤缺氧、血管生成与肺癌的关系的研究
• 前言
• 材料与仪器
• 一、主要生化试剂及来源
• 二、主要仪器和器材
• 第一部分 碳酸酐酶Ⅸ、血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达及意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 血管内皮生长因子和内皮抑素检测 对结核性和癌性胸腔积液的诊断价值
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第三部分 吸烟者血清 VEGF 和endostatin 水平的变化及其意义
• 前言
• 对象与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 英文论文
• 全文结论
• 英文缩略词一览表
• 综述一
• 参考文献
• 综述二
• 参考文献
• 攻读博士学位期间发表的论文
• 致谢