论文摘要
目的:观察胰高糖素样肽1（GLP-1）对大鼠胰岛胰岛素分泌功能及胰岛β细胞分化和成熟相关转录因子表达的调控作用及其对大鼠胰岛的促增殖和抗凋亡功能。探讨GLP-1对胰岛功能调控的机制,进一步阐明GLP-1在糖尿病治疗中的地位和作用。 方法:采用改良胶原酶消化法,分离胰岛,进行形态及功能鉴定后,（1）以10nmol/L的GLP-1与原代培养的大鼠胰岛细胞分别共育1、3、5天,共育结束后分别行葡萄糖刺激下的胰岛素分泌反应（GSIS）,在葡萄糖刺激前及刺激后的10、20、60分钟分别收集细胞培养上清液,运用放射免疫法检测胰岛素含量的变化。（2）予10nmol/L的GLP-1与大鼠胰岛细胞分别共育1、3、5天后,提取细胞总RNA,运用RT-PCR技术分别检测胰岛素（INS）、葡萄糖转运体2（GLUT2）基因及胰岛细胞转录因子胰十二指肠同源盒基因-1（PDX-1）、PAX-6及NKx2.2基因mRNA表达的变化。（3）以不同浓度的GLP-1与大鼠胰岛细胞瘤细胞株RINm5f共育,以4-甲基偶氮四唑蓝（tetrazolium Salt,MTT）法观察其增殖情况。用流式细胞术检测GLP-1对白细胞介素1β（IL-1β）诱导的RINm5f细胞凋亡的保护作用及用RT-PCR方法检测GLP-1对原代培养大鼠胰岛BAX及BC1-2基因表达的调控作用。 结果:（1）与GLP-1共育后,大鼠胰岛基础胰岛素分泌量增加,GSIS试验中各时间点胰岛素分泌量均升高,且INS基因及GLUT2基因的表达均随着与GLP-1共育时间的延长呈时间依赖性的增强。（2）与GLP-1共育1天后,大鼠胰岛PDX-1、PAX-6及NKx2.2基因的mRNA表达量显著增加,且随着
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