论文摘要
大青叶系十字花科植物菘蓝（Isatis indigotica Fort.）的干燥叶,为常用的清热解毒类中药之一,临床应用多年,疗效显著。现代研究证明大青叶药效涵盖了多种化学成分,多环节、多靶点作用于机体而发挥出的综合效应。但是至今为止,对于大青叶的研究无论是化学还是药效学都过于分散而缺乏系统性,仍然不能明确其药效物质,阐明其作用机理,导致无论是药材还是复方制剂的质量控制均没有科学客观的方法和指标。因此,有必要寻找与清热解毒功效相关的活性指标成分,用于评价控制大青叶及其制剂的质量。目的:以大青叶清热解毒功效实质为指导,探寻科学合理的能反映大青叶药材及制剂内在质量的有效控制指标,建立大青叶质量的化学评价新方法。方法:本实验首次以血清药物化学的研究手段和方法为基础,运用HPLC-DAD技术,比较空白血清与含药血清的差别,建立大青叶口服后血清中移行成分色谱图。并且在已建立的经典的内毒素所致家兔发热模型的基础上研究色谱图与药效的相关性。运用大孔吸附树脂、硅胶及HPLC/MS、NMR从大青叶中分离和鉴定活性成分。本文对6个产地的大青叶药材样品的性状、鉴别、检查以及其中的邻氨基苯甲酸、丁香酸和靛蓝、靛玉红等两大类计4种指标成分的含量测定做了综合评价。结果:通过研究发现血中有一主导成分与抑制内毒素所致家兔发热活性具有很大的谱效相关性。并通过比较色谱和光谱图,在相同的保留时间下,色谱图中的特征峰代表的物质在含药血清与灌胃药液中均有较高含量,其紫外光谱相同,最大吸收在250 nm左右,很可能以上两种物质为同一物质。本实验结合其理化性质从大青叶中分离得到该成分,命名为“DQY251”,并鉴定其为色胺酮。通过对6个不同产地大青叶的质量综合评价研究,建立了以邻氨基苯甲酸、丁香酸和靛蓝、靛玉红等两大类为指标成分评价大青叶质量的新方法。结论:本实验运用血清药物化学方法探讨大青叶血清抗内毒素活性成分,得到一主导成分——色胺酮,方法科学、合理,设计严谨并具有创新性。同时建立了大青叶质量的化学评价新方法,发现6个不同产地的大青叶中质量及指标成分含量稳定性最佳的为安徽亳州产大青叶,更系统、更全面地评价了大青叶的质量。