携带TIMP-3基因的重组腺病毒对宫颈癌治疗的体内外实验研究

论文题目: 携带TIMP-3基因的重组腺病毒对宫颈癌治疗的体内外实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 妇产科学

作者: 张颖

导师: 向阳,林晨

关键词: 基因治疗,腺病毒,宫颈癌

文献来源: 中国协和医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 细胞对细胞外基质成分(extracellular matrix，ECM)的降解是肿瘤发生和发展过程中最重要的分子事件，基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases MMPs)是一类最重要的执行ECM降解的水解酶，多种肿瘤组织中都伴有MMPs的高表达。基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitors of metalloproteinase TIMPs)是一类能特异性抑制MMPs功能的活性因子，对抑制肿瘤浸润和转移有重要功能。TIMP-3是TIMPs家族的新成员，由于它诱导肿瘤细胞凋亡和抑制血管形成的作用，使其在肿瘤治疗中越来越受到重视。我们用RT-PCR和Western Blotting检测不同宫颈癌细胞中TIMP-3的表达情况，显示在侵袭能力最强的CaSKi细胞中TIMP-3的表达量最低，提示TIMP-3的水平与细胞浸润能力的强弱呈负相关性，为我们选择用TIMP-3治疗宫颈癌提供了根据。对宫颈癌等常见的妇科恶性肿瘤细胞用携带绿色荧光蛋白的重组腺病毒(Ad-GFP)感染谱的测定的结果表明宫颈癌，尤其是HPV阳性的宫颈癌细胞对腺病毒有高度易感性，以腺病毒为载体的基因治疗对宫颈癌有独特的优越性。利用新一代的腺病毒AdEasy~TM系统，采用两步感受念法，我们成功组建了携带TIMP-3基因的重组腺病毒载体(Ad-TIMP-3)。多种细胞凋亡检测方法显示Ad-TIMP-3转染可以强烈地诱导宫颈癌细胞的凋亡，并存在显著的旁观者效应；流式细胞分析表明TIMP-3可引起CaSKi细胞的G2／M期阻滞；MTT测定Ad-TIMP-3对细胞的杀伤效应强于Ad-P53；Ad-TIMP-3和顺铂或放疗联合使用可使疗效明显增强，起到效应相加或协同作用。对裸鼠宫颈癌皮下移植瘤用Ad-TIMP-3单独瘤体内注射或与顺铂腹腔内注射联合使用均可明显抑制肿瘤生长。体内外实验结果均证明了Ad-TIMP-3可有效地治疗宫颈癌。

论文目录:

缩略词表

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分 TIMP-3在宫颈癌细胞系中的表达

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第二部分宫颈癌等常见妇科恶性肿瘤细胞重组腺病毒感染谱的测定

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第三部分携带TIMP-3基因的重组腺病毒构建

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第四部分携带TIMP-3基因的重组腺病毒对宫颈癌治疗的体内外实验研究

材料和方法

结果

讨论

参考文献

三氧化二砷抑制人乳头瘤病毒蛋白表达及诱导宫颈癌细胞凋亡

总结

综述: 基质金属蛋白酶组织抑制因子和肿瘤

致谢

个人简历

发布时间: 2006-10-13

参考文献

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携带TIMP-3基因的重组腺病毒对宫颈癌治疗的体内外实验研究

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