本文主要研究内容
作者许兰,陈思航,田瑞莹,尚书凤（2019）在《人铁氧还蛋白表达载体构建》一文中研究指出：目的为了将人铁氧还蛋白（adrenodoxin,FDX）在293T细胞中表达,扩增FDX的ORF,将FDX的ORF插入到哺乳动物细胞表达载体pcDNA的NotI/KpnI,构建表达载体。方法以GeneBank报道的FDX的mRNA序列（NM004109.5）为模板设计引物,在5’和3’分别引入限制性酶切位点NotI和KpnI,从HepG2的cDNA中扩增FDX的ORF,将FDX的PCR产物和空载体pcDNA3.1用NotI和KpnI双酶切4 h,酶切产物用DNA回收试剂盒回收。将FDX的PCR酶切产物分别连接到空载体NotI/KpnI,连接产物转化DH5α,培养过夜。挑单克隆,用PCR鉴定阳性克隆并测序。结果经1%琼脂糖凝胶电泳和EB染色,观察到一500 bp条带,阳性克隆的测序结果与GeneBank报道的核酸序列一致。结论应用常规分子克隆方法已成功构建了FDX的真核表达载体pcDNA-FDX。
Abstract
mu de wei le jiang ren tie yang hai dan bai （adrenodoxin,FDX）zai 293Txi bao zhong biao da ,kuo zeng FDXde ORF,jiang FDXde ORFcha ru dao bu ru dong wu xi bao biao da zai ti pcDNAde NotI/KpnI,gou jian biao da zai ti 。fang fa yi GeneBankbao dao de FDXde mRNAxu lie （NM004109.5）wei mo ban she ji yin wu ,zai 5’he 3’fen bie yin ru xian zhi xing mei qie wei dian NotIhe KpnI,cong HepG2de cDNAzhong kuo zeng FDXde ORF,jiang FDXde PCRchan wu he kong zai ti pcDNA3.1yong NotIhe KpnIshuang mei qie 4 h,mei qie chan wu yong DNAhui shou shi ji he hui shou 。jiang FDXde PCRmei qie chan wu fen bie lian jie dao kong zai ti NotI/KpnI,lian jie chan wu zhuai hua DH5α,pei yang guo ye 。tiao chan ke long ,yong PCRjian ding yang xing ke long bing ce xu 。jie guo jing 1%qiong zhi tang ning jiao dian yong he EBran se ,guan cha dao yi 500 bptiao dai ,yang xing ke long de ce xu jie guo yu GeneBankbao dao de he suan xu lie yi zhi 。jie lun ying yong chang gui fen zi ke long fang fa yi cheng gong gou jian le FDXde zhen he biao da zai ti pcDNA-FDX。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自科技创新导报的许兰,陈思航,田瑞莹,尚书凤，发表于刊物科技创新导报2019年07期论文，是一篇关于铁氧还蛋白论文,细胞色素论文,表达载体论文,科技创新导报2019年07期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自科技创新导报2019年07期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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